[血脂康对高脂血症大鼠脂联素\瘦素及动脉粥样硬化的影响] 动脉粥样硬化的治疗
时间：2019-01-23 04:43:04 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘要:目的 观察血脂康对高脂血症大鼠的疗效，通过治疗前后脂联素、瘦素变化，探讨其保护内皮、抗动脉粥样硬化的机制。方法 实验用清洁级SD大鼠36只，随机分为3组，每组12只。正常对照组饲喂普通饲料，余各组饲喂高脂饲料。高脂血症大鼠造模成功后随机分为2组，每组12只。正常对照组灌胃纯净水2 mL，1次/日；实验对照组灌胃纯净水2 mL，1次/日；血脂康组灌胃血脂康1 000 mg/（kg・d），1次/日。观察6周后血脂、脂联素、瘦素水平的变化，并作病理切片观察动脉粥样硬化情况。结果 治疗6周后，血脂康组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂联素、瘦素与灌胃前比较有统计学意义（P0.05）。血脂康组动脉标本病理切片显示其病变情况较实验对照组明显减轻。结论 血脂康具有明确的调脂、抗动脉粥样硬化作用。
关键词：动脉粥样硬化；脂联素；瘦素；血脂康
中图分类号：R589.2 R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1349（2011）08-0969-03
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的发生发展是一个复杂的动态过程。起始步骤很可能是动脉内皮功能障碍，涉及的危险因素有高胆固醇血症、高血压、吸烟及糖尿病等。脂联素（adiponectin）、瘦素（leptin）是脂肪组织分泌的细胞因子。脂联素不仅与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病有关，还具有抗炎症、抗AS作用；而瘦素可能通过影响血脂代谢、诱导氧化应激及炎症反应参与AS的形成。本文通过血脂康对脂联素、瘦素的影响表明其抗动脉粥样硬化的另一机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物与造模方法 实验用清洁级SD大鼠36只，雄性，体重200 g±10 g（南京军区南京总医院比较医学科提供）。由比较医学科技师将实验大鼠随机分组，分笼饲养，饲养环境温度25 ℃恒温。
大鼠适应环境1 d后开始实验。各组大鼠实验开始时在无菌操作下，一次性腹腔内注射维生素D36×105 U/kg。随后正常对照组饲喂普通饲料，余各组饲喂高脂饲料。造模6周后，各组随机取眼眶血4 mL，标本离心后取血清检测血脂指标，证实造模成功，进入治疗阶段。
1.2 动物分组及治疗 实验动物随机分为3组，每组12只。正常对照组（A组）灌胃纯净水2 mL，1次/日；实验对照组（B组）灌胃纯净水2 mL，1次/日；血脂康组（C）灌胃血脂康（由北大维信生物科技有限公司生产，批号20070611）1 000 mg/（kg・d），1次/日。各组均于每日09：00定时灌药。
1.3 血液及病理标本采集测定 治疗6周后，禁食不禁水1 d。应用氯胺酮100 mg/kg腹腔内注射麻醉，待大鼠意识丧失、四肢肌肉松弛后（约5 min～10 min），将大鼠四肢固定于动物手术台上。
1.3.1 血液标本 首先于剑突下剪开皮肤及皮下组织，剖开胸腔暴露心脏，于下腔静脉右心房处，以无菌注射器取血8 mL～10 mL，将血暂时存放生化管中，4 ℃冰箱保存。血标本采集完毕，离心后取血清于-70 ℃恒温冰箱内保存待测。脂联素、瘦素测定均采用双抗体夹心ELISA法。
1.3.2 动脉标本 自上向下完全剖开大鼠腹腔，分离左右髂动脉，自下向上自髂动脉分支处至主动脉瓣处分离腹主动脉、胸主动脉、主动脉，连同心脏离体。清除动脉外膜结缔组织，然后自髂动脉分支处由下向上纵向剖开动脉，置于4%中性甲醛缓冲液固定。
1.3.3 病理标本 光镜下观察：自髂动脉分支处及以上部位，取3 cm长度动脉，经包埋蜡封后切片，HE染色。显微镜下观察各组动脉粥样硬化病变情况。
1.4 主要试剂及仪器设备 CRP、IL-6试剂盒（美国ADL公司生产，南京夏斯生物科技公司提供），脂联素、瘦素试剂盒（上海西唐生物科技有限公司），Olympus2700型生化自动分析仪，酶标仪型号：DENLEY DRAGON Wellscan MK3（Thermo，芬兰），洗板机型号：Wellwash 4 MK2 （Thermo，芬兰），数字显示隔水式电热恒温培养箱型号：PYX-DHS，离心机型号：TGL-168（上海安亭科学仪器厂）。
1.5 统计学处理 数据以均数±标准差（x±s）表示，两组间均数比较采用独立样本t检验或方差分析。所有资料采用SPSS 13.0软件包进行统计分析。
2 结 果
2.1 各组治疗前后血脂比较（见表1） 实验对照组、血脂康组治疗前总胆固醇明显高于正常对照组（P0.05）。
表2 3组灌胃前后脂联素、瘦素水平（x±s）
2.3 主动脉的病理变化 正常对照组：镜下可见动脉壁结构正常，内膜完整、光滑，中膜细胞排列整齐，弹力层完整，结构清晰。实验对照组：镜下可见典型AS病变，动脉内膜增厚，有大量溃疡形成向管腔突起，平滑肌细胞减少，细胞排列紊乱，弹力纤维断裂而结构不清，可见明显脂质核心。血脂康组：镜下可见其动脉壁结构正常，内膜完整、光滑，中膜细胞排列整齐，弹力纤维完整，结构清晰，中膜细胞内可见少量脂肪空泡形成。
3 讨 论
动脉粥样硬化是一个极慢而复杂的病理过程，在这个过程中单核细胞被AS早期活化的内皮细胞产生的一些黏附分子黏附在动脉壁，进入内皮下分化为巨噬细胞，巨噬细胞通过其表面的清道夫受体过度摄取脂质成为泡沫细胞，且血管平滑肌细胞增殖和迁移，这些是AS发病的关键步骤。脂联素是近来发现的脂肪细胞因子，也称为GBP-28［1，2］，是由apM1基因编码的含244个氨基酸的蛋白，在人类脂肪细胞中特异性地高表达［1］。多项研究表明脂联素具有抗炎、抗动脉粥样硬化作用。针对动脉粥样硬化形成的几种主要细胞成分其作用机制有以下方面：研究［3］发现脂联素能减少肿瘤坏死因子α所刺激内皮细胞表达的细胞黏附分子VCAM-1、E-选择素、ICAM-1等，从而防止血液中单核细胞等黏附到内皮细胞上；并发现［4］脂联素能抑制单核细胞来源的巨噬细胞脂质摄取及清道夫受体的表达，抑制巨噬细胞向泡沫细胞的分化。进一步研究［5］显示脂联素通过白介素-10（IL-10）表达选择性增加人巨噬细胞中组织金属蛋白酶抑制剂1的表达而防止斑块破裂，减少血栓形成。表明不仅在炎症反应所导致的动脉粥样硬化的初始形成及进展，而且在其急性血栓并发症中，脂联素都起着极重要的作用。
瘦素是由白色脂肪组织合成和分泌的一种多肽激素，是由肥胖基因的编码产物。有研究发现瘦素有浓度依赖性的促血小板聚集作用。在动脉粥样斑块中，瘦素可使血管内皮生长因子VEGF、基质金属蛋白酶合成增加，从而导致血管重塑。WOSCOPS研究显示，瘦素是独立的冠心病危险因素，可通过独立影响脂代谢参与冠心病，其可直接抑制三酰甘油的形成和促进脂肪酸的氧化。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 血脂康是从中药红曲中提炼精制而成的天然他汀类药物，主要成分为洛伐他汀，还含有多种不饱和脂肪酸和必需氨基酸。研究表明血脂康［6］使氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）巨噬细胞降解值下降，抑制巨噬细胞摄取ox-LDL；明显下降CRP［7］，并且与血脂变化无明显相关；抑制血管平滑肌细胞增殖迁移［8］；减轻动脉粥样硬化，维持血管壁弹性及减少粥样硬化的面积［9］。表明血脂康具有抗炎、抗动脉粥样硬化作用。本次试验表明，血脂康不但具有直接抗炎作用，还可通过对脂联素、瘦素的影响抗动脉粥样硬化作用。
参考文献：
［1］ Maeda K,Okubo K,Shimomura I,et al.cDNA cloning and expression of a novel adiposespecific collagen-like factor,apM1 （adipose most abundant genetranscript 1）［J］.Biochemical and Biophysical Research Communications，1996，221：286-289.
［2］ Nakano Y,Tobe T,Choi-Miura NH,et al.Isolationand characterization of GBP28,a novel gelatin-binding protein purified from human plasma［J］.J Biochem,1996,120:803-812.
［3］ Noriyuki O，Shinji K，Yukio A，et al.Novel modulator for endothelial adhesion molecules adipocyte-derived plasma protein adiponectin［J］.Circulation，1999，100:2473-2476.
［4］ Noriyuki O,Shinji K,Yukio A,et al.Adipocyte-derived plasma protein,Adiponectin,suppresses lipid accumulation and class a scavenger receptor expression in human monocyte-derived macrophages［J］.Circulation,2001,103:1057-1063.
［5］ Masahiro K,Shinji K,Noriyuki O,et al.Adiponectin specifically increased tissue inhibitor of metalloproteinase-1 through interleukin-10 expression in Human Macrophages［J］.Circulation,2004,109:2046-2049.
［6］ 徐伯平，程蕴林，鲁翔,等.血脂康对鼠巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白能力影响的观察［J］.江苏预防医学，2004，15：9-13.
［7］ 王锋，朱川.血脂康对血脂异常患者C反应蛋白的影响［J］.广州医药，2003，33（5）：32-33.
［8］ 曾定尹，于波，郑晓伟，等.血脂康对家兔血管平滑肌细胞增殖迁移的抑制作用［J］.中华内科杂志，1998，37：367-370.
［9］ 郑广娟，张文高，张亚同，等.血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响［J］.中国动脉硬化杂志，2003，11（5）:408-410.
作者简介：吴冬梅，女，毕业于南京中医药大学，主治医师，医学博士，现工作于南京军区南京总医院汤山分院（邮编：210011）；潘涛，工作于南京中医药大学第一临床医学院；施广飞（通讯作者），工作于江苏省南京市鼓楼医院（邮编：210008）。
（收稿日期：2011-04-19）
（本文编辑 郭怀印）
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