用于原发性肝癌诊断的新型肿瘤标记物研究现状

王岩 吕呈 李鲁平 张明香 邢卓越 戴越 项丹 谷野

【摘要】 原发性肝癌（Primary Hepatocellular Cglcinoma，PHC）为临床中最常见的恶性肿瘤之一。PHC在我国已被列入重点筛查和预防治疗的疾病。PHC起病隐匿，临床中PHC早期多没有特征性临床表现。因此，血清学标志物的诊断价值对肝癌早期诊断尤为重要。目前，甲胎蛋白（AFP）作为诊断和监测PHC最常用的指标，具有一定的价值，但临床中小肝癌的AFP可呈阴性，同时一些慢性肝病患者的血清AFP可呈现阳性，因此，新型灵敏度及特异度高的血清肿瘤标志物，成为学者们研究的热点。现就用于原发性肝癌肿瘤标记物的研究进展做一综述。

【关键词】 原发性肝癌 新型肿瘤标记物 研究现状

[Abstract] Primary Hepatocellular Cglcinoma （PHC） is a common malignant tumor in the world. In China， it has been included in one of the key malignant tumors for screening and prevention. The onset of liver cancer is insidious and has no clinical specificity in the early stage. Therefore， the diagnostic value of serological markers is particularly important for the early diagnosis of liver cancer. At present， alpha-fetoprotein is the most commonly used indicator for diagnosis and monitoring of liver cancer. However， the AFP of small liver cancer can be negative， while the serum AFP of most patients with chronic liver disease can be positive. Therefore， the new sensitivity and specificity of serum are high. Tumor markers have become a hot topic for scholars. The research progress of tumor markers for primary liver cancer is reviewed.

[Key words] Primary liver cancer New tumor markers Research status

First-authors address：
Shenyang Sixth Peoples Hospital， Shenyang 110000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.19.043

原发性肝癌（Primary hepatocellular cglcinoma，PHC）简称肝癌，是一种病死率高、发病率高的恶性肿瘤。PHC早期诊断困难，临床尚缺少对诊断有重要价值的血清学标志物。临床中目前仍以检测甲胎蛋白作为诊断和监测指标。但AFP在临床中对肝癌的检查存在一定的局限性，甚至出现误诊、漏诊情况[1]。新型灵敏度及特异度高的血清肿瘤标志物对肝癌的诊断具有重要的意义，近些年对肝癌血清肿瘤标志物的研究层出不穷，现对原发性肝癌肿瘤标记物进行文献研究，汇总近3年原发性肝癌肿瘤标记物研究的成果，并分析每种标记物的特征与应用价值，为今后研究提供可靠的基础文献研究依据。

1 甲胎蛋白异质体L3（AFP-L3）AFP主要分为AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3三种类型，临床中通常采用检测AFP定量（AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3异质体的总和）对疾病进行诊断，但特异性不高。AFP-L1目前主要用来检测慢性肝炎、肝硬化等良性的肝脏疾病;AFP-L2目前主要来自于孕妇;AFP-L3则主要用来检测恶性的肝脏疾病，即肝癌。临床中仅依靠传统AFP>400 ng/L作为PHC的诊断标准存在误诊和漏诊现象。相关研究发现在AFP<400 ng/L的患者中AFP-L3/AFP比例很高，AFP-L3/AFP值可以用于诊断和鉴别诊断低水平AFP持续阳性患者[2]，故临床中AFP-L3的检测可能会成为诊断肝癌的最有价值的标志物。

2 高尔基体蛋白-73（GP-73）GP-73与多种肝脏疾病，尤其是HCC的发生、发展密切相关，GP-73在肝病发展过程中其表达是逐步上调的：正常肝细胞很少甚至不表达，在肝脏出现急性炎症或严重肝纤维化时GP-73可有轻度上升，而在HCC时GP-73的表达可达到较高水平[3]。杨硕等[4]研究中，原发性肝癌患者的阳性检出率明显高于其他组，GP-73的敏感度、特异度、准确度均高于AFP及AFP-L3。众多研究表明GP-73可作为HCC早期检测的血清標志物，且血清GP-73在HCC肿瘤物切除后降低，在肿瘤复发后升高。因此，血清GP-73含量可作为一个主要指标，对于肝癌的临床诊断有重要意义[5-6]。

3 热休克蛋白（HSP70）近年来的研究发现，热休克蛋白和肿瘤的关系密切，临床上HSP70在癌组织中高度表达，包括HCC。已有研究示，HSP70在肝癌进展期呈正性调节，HSP70可促进肝癌的发生发展，在肝癌增殖、转移及侵袭过程中具有重要作用，未来可能成为潜在的HCC治疗靶点[7-8]。

4 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3（GPC-3）GPC-3是一种膜性硫酸乙酞肝素蛋白多糖，在细胞生长和分化中起重要作用[9-10]，在HCC中细胞膜上高表达，在正常肝组织或良性肝脏病变中呈阴性，表达强度与肝细胞癌分化程度有关，在HCC中，其灵敏度与特异度分别为（56.8%～100%）、（90%～100%），癌组织分化程度越低，敏感性越高[11]。此外在生殖细胞肿瘤，胚胎型恶性肿瘤，卵巢肿瘤和黑素瘤中也报道了GPC-3的表达。

5 异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）PIVKA-Ⅱ是维生素K缺乏或拮抗剂2诱导的蛋白，研究显示PIVKA-Ⅱ可以提高PHC的早期筛查和诊断，在AFP阴性肝癌患者中，PIVKA-Ⅱ的cut-off值为116 mAU/mL时，其敏感性和特异性为64.6%和87.9%，可作为AFP阴性的肝癌的补充诊断，PIVKA-Ⅱ水平高低与肿瘤直径、BCLC分期也具有关性[12]。异常凝血酶原在预测肝癌发生中也有一定的作用，对623例丙肝患者随访3年，经单因素变量分析，高DCP（≥40 mAU）是肝癌发生的独立预测因素[13]。

6 肿瘤特异性生长因子（tumorspecificgrowthfactor，TSGF）TSGF与原发性肝癌的形成、生长、转移以及浸润有一定的關系，当原发性肝癌患者的癌细胞、周边毛细血管等不断增生时，会不断被释放到外周血中，进而导致TSGF水平不断升高，并促进原发性肝癌血管增生[14-15]。

7 肿瘤特异性生长因子（tumorspecificgrowthfactor，TSGF）TSGF作为一种可溶性多肽类的物质，常出现于肿瘤细胞中，TSGF能够造成肿瘤周围毛细血管的扩大，侵袭外周血管。相关研究发现，TSGF是一种仅在恶性肿瘤检测中呈现阳性表达的标记物，说明TSGF具有对肿瘤检测的特异性。TSGF在肿瘤病变发生早期已经呈现出高水平表达，具有对恶性肿瘤的早期诊断可能。已有相关文献[16-17]报道TSGF与肝细胞性肝癌增值、迁移及浸润等密切相关。此外TSGF评估肝癌介入手术治疗效果也有一定的价值。有研究示，显示以79.33 U/mL为截点值，治疗后7 d TSGF的下降水平预测单次介入治疗有效的敏感性和特异性均超过80%，优于AFP。同时相关性分析提示TSGF下降水平与AFP下降水平呈现正相关[18]，在评估肝癌介入治疗的效果上优于传统的AFP指标。

8 AFP-IgM复合物AFP与IgM形成AFP-IgM复合物，AFP-IgM复合物能够在PHC早期出现，能够有效提高对PHC的诊断的灵敏度和准确性，同时对小细胞肝癌的诊断效能更高[19]。

9 M2-PKM2-PK隶属于丙酮酸激酶（PK）的一种同工酶，是目前研究较多的一种新型肿瘤标志物，是肝癌细胞发生、发展一个重要的因素[20]。

10 骨桥蛋白（OPN） OPN为一种分泌型非胶原化糖蛋白，具有促进细胞趋化、血管形成、黏附、侵袭迁移、抑制细胞凋亡等作用[21-22]。研究发现，在肝癌手术切除患者中，OPN的表达与甲胎蛋白（AFP）的表达、p53突变、肿瘤的大小、肿瘤分期晚、分级程度高、肿瘤的复发转移以及更低的10年生存率呈正相关，在乙型肝炎相关的肝癌患者中OPN的表达水平与门静脉侵袭和淋巴结转移呈正相关，与PHC患者的预后呈负相关[23]，在肝癌转移灶中显著高表达[24]。

11 人锌指蛋白23（hZNF23）hZNF23是指含有结合Zn2+稳定的短的可以自我折叠形成“手指”结构的一类蛋白质，hZNF23可能通过造成细胞周期停滞，从而抑制肿瘤的生长和发育、细胞分化、细胞转化及细胞周期的调控。相关研究发现hZNF23与肝癌恶性程度呈负相关关系，能够反映恶性肿瘤生物学行为，对诊断、分期、治疗、预后起到重要的参照物作用[25]。

12 Stahmin蛋白Stathmin蛋白是新近研究较多的一种微管不稳定蛋白，Stathmin蛋白在细胞周期的不同阶段通过磷酸化和去磷酸化的作用能够对机体细胞微管系统动力平衡起到有效的调节作用。Stahmin蛋白在多种恶性肿瘤机体中表达量异常增高，可以作为是肝癌切除术后复发的独立危险因素[26]，对肝癌的复发具有重要的预测作用。

13 催化酶类尿激酶性纤溶酶原激活剂（uPA）是丝氨酸蛋白酶类，PHC患者的uPA异常高表达;金属基质蛋白酶MMP-2和MMP-9与多种肿瘤的侵袭转移具有相关性，研究发现MMP-2、MMP-9与肝癌的侵袭程度呈正相关[27]。胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3（IMP3）及X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）均与PHC关系密切。IMP3能够对肝癌的复发与分期进行预测，相关研究发现：IMP3表达主要集中在肝癌瘤体的边缘、浸润处及卫星结节和癌栓，一定程度上说明IMP3参与了肝癌患者肿瘤细胞的迁徙与侵袭，同时IMP3的表达量高低和PHC的分级、分期、瘤体大小关系密切，肿瘤恶性程度越高，IMP3表达越高[28]。XIAP的高表达亦对PHC的复发和预后起到一定的作用，能够有效预测患者疾病转归[27]。

14 基因及其转录产物人端粒反转录酶mRNA是在PHC诊断中研究较多的转录产物之一，一般情况下健康人的人端粒反转录酶mRNA表达量较低，而PHC患者的表达量异常增高，同时表达量的高低与肿瘤瘤体大小、肝脏组织出现结节数量和PHC分化程度关系密切。人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶（APEL基因）的异常增高能够提示机体可能存在肝癌瘤体，相关研究发现，APEL具有一定调控肝癌细胞生物学行为的能力，与肝癌的发生发展具有相关性。微小RNA（miRNA）是由21-25个核苷酸构成的非编码小分子RNA，微小RNA能够有效调控肿瘤细胞的增殖和分化，对肿瘤的生长起到一定的抑制作用[29]。故研究过程中认为miRNA表达谱对PHC的早期诊断和治疗具有一定的价值和作用。除了上述肿瘤标记物，如：循环游离DNA（cfDNA）、循环肿瘤细胞（CTC）、ickkopf1（DKK1）蛋白、核翻译延长因子1A2（eEF1A2）、醛-酮转化酶（aldo-keto reductase，AKR）、Wnt通路抑制因子1（dikkopf-1）、HTATIP2/TIP30等[30]。

综上所述，具有特异性表达的肿瘤标记物对PHC的诊断、治疗、疾病转归等有重要的价值，对于新型肿瘤标记物的研究应再今后引起重视，尽早发现能够对PHC早期具有诊断价值的标记物，为PHC的诊断、监测、治疗提供更好的证据。

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（收稿日期：2019-08-06） （本文編辑：周亚杰）