婴幼儿配方奶粉中营养强化剂的检测
时间：2020-11-09 14:02:34 来源：达达文档网 本文已影响 人 
刘猛
摘要：目的：建立一种婴儿配方奶粉中1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（OPO）的气相色谱检测方法。方法：用正己烷溶解样品，通过耐高温毛细管柱分离，再用气相色谱仪FID检测器检测，内标法定量。结果：样品加标回收率在85%～95%，相对标准偏差在3%以内，本方法的检出限为0.8 ug/mL。结论：本方法操作简便，检出限低，重复性好，适用于婴儿配方奶粉中OPO含量的测定。
关键词：1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯；
婴儿配方奶粉
1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（以下简称OPO）作为一种营养强化剂被中国卫生部第13号公告[1]批准可用于婴儿配方奶粉中。因此近年来，OPO成为各个婴儿配方奶粉厂商常规添加物质进而来模仿母乳的营养成分。结构油脂OPO不仅具有改善婴儿营养吸收的功能性，而且对完善骨骼强化及胃肠成熟等方面也有作用[2]。因此，检测婴儿配方奶粉中结构油脂的含量就成为一个重要的课题。
一、材料与方法
（一）仪器与试剂
1.仪器
美国PE公司Clarus 580 气相色谱仪，配有FID 检测器；
毛细柱：DB-1 HT 30 m ×0.25mm×0.10 um；
德国盖玻离心机；
德国IKA漩涡振荡器；
德国 IKA 旋转蒸发仪；
梅特勒万分之一天平；
水浴锅。
2.试剂
OPO标准品，纯度≥99%，Sigma；
内标物-十七烷酸甘油三酯，纯度≥99%，Sigma；
正己烷，色谱纯，DIKMA公司；
乙醚、石油醚、无水乙醇，分析纯，天津科密欧公司。
3.标准溶液的配制
称量34.5 mg内标物和4.9 mg OPO标准品于10 mL容量瓶中，分别用正己烷定容。内标溶液现用现配。
4.实验样品
市售婴儿配方奶粉 （配方中不含有 OPO）。
（二）试验方法
1.仪器条件
进样口温度：320℃；
柱温箱：起始温度300℃，保持1 min，以20℃/min的速率升至380℃保持10 min；
检测器温度：370℃；
载气：高纯氮，1.3 mL/min；
空气：450 mL/min；
氢气：45 mL/min；
进样量：1.0 uL；
分流流量：20 mL/min。
2.样品处理
（1）含淀粉的试样：将固体样品充分混匀，准确称取1000.0 mg，精确到0.1mg，然后放置于毛氏抽脂瓶内。向瓶中加入100 mg的淀粉酶（酶活力 1.5U/mg）并混匀。将适量去离子水加热至45℃，取8-10 ml加入抽脂瓶中，摇匀。盖紧瓶盖并放入55℃水浴锅中加热2小时，于每10 min取出一次并摇匀。检验淀粉是否水解完全：向瓶中加入两滴100 mmol/L的碘溶液，若未显示蓝色，说明水解完全。如若出现蓝色，则要将抽脂瓶放回水浴锅中继续加热，直至蓝色消失，淀粉水解完全后再取出抽脂瓶冷却。
（2）脂肪的提取：向抽脂瓶中加入氨水3.0 ml，混合均匀。将抽脂瓶放在60℃恒温水浴锅中反应15-20 min，然后取出冷却到室温。然后向瓶中加入乙醇 10 ml和刚果红溶液一滴，混匀后加入乙醚 25 ml，将瓶塞盖紧，放在振荡器上1 min。接着加入石油醚 25 ml，再震1 min，于4000 r/min离心分层。将上清放在100 ml鸡心瓶，这是第一次提取。然后对剩下的样品重复上述提取步骤，得到的上清与第一次得到的合并。将鸡心瓶置于真空旋转蒸发器或氮吹仪上，除去溶剂，保留的残渣即为脂肪。用10 mL正己烷溶解，得到样品制备液备用。
3.标准品测定
分别吸取100 uL 1.1.3中的内标和 900 uL 1.1.3中的OPO标准溶液于2 ml进样瓶中，混匀。瓶内内标物终浓度为345 ug/mL，OPO终浓度为 441 ug/mL。标准品上机检测，根据公式 1 计算响应因子Fi。
4.样品测试
准确移取样品制备液1 mL，再移取3.45 mg/mL的内标1 mL于10 mL容量瓶中，用正己烷定容混匀，以备GC检测。
5.回收率与精密度测定
分别在3份同一样品中加入OPO标准品 10，20，40 mg，按照步骤处理，每个水平作三个平行，以峰面积为定量基准，计算方法回收率，并在同一水平计算其精密度。
6.检出限测定
将1.2.3中配制的含OPO标准溶液注入GC检测，以信噪比等于3来计算检出限。
二、结果
（一）响应因子
通过下面公式计算OPO的响应因子。
经过计算被测奶粉中OPO的含量为4.46%，根据卫生部第13号公告要求，一段婴儿配方奶粉中OPO的加入量应在3.2—9.6%。所以被测一段婴儿配方奶粉中OPO的加入量是合乎要求的。
（三）回收率与精密度
在市售奶粉样品中，依据1.2.5步骤考察回收率和精密度，由表1结果可以看出，加标回收率在85%～95%，相对标准偏差在3%以内，满足定量要求。
（四）方法检出限
根据1.2.6计算可知，OPO的检出限为0.8 ug/mL。
三、讨论
通过以上结果可知，OPO（以C52计）通过高温色谱柱可有效分离；
用FID检测器检测，具有良好的重现性及回收率。检测结果表明市售婴儿配方奶粉中opo含量符合卫生部第 13 号公告要求。综上所述，该方法满足奶粉生产企业对婴儿配方奶粉产品中結构油脂质量的监督及检验。
参考文献：
[1]2008年中华人民共和国卫生部第13号公告.
[2]王素雅，李国亮.构造脂质及脂肪酶促合成研究进展[J].中国油脂，2002，02.
