D级食管糜烂_β-catenin和CathepsinD在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义
时间：2019-01-17 04:26:34 来源：达达文档网 本文已影响 人 
【摘要】目的 探讨β-catenin和CathepsinD在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学EnVision二步法检测60例ESCC组织和15例正常食管组织中β-cat及Cath-D的表达，分析表达与ESCC临床病理特征的关系。结果 （1）β-cat在正常食管组织和ESCC组织中的异常表达率分别为0%（0/15）、66.67%（40/60），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。β-cat在ESCC高分化组和中低分化组中的异常表达率分别为38.46%（10/26）、88.23%（30/34），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。β-cat在ESCC未侵及肌层组和侵及肌层组中的异常表达率分别为33.33%（5/15）、77.78%（35/45），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。β-cat在ESCC无淋巴结转移组和有淋巴结转移组中的异常表达率分别为48.39%（15/31）、86.21%（25/29），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）Cath-D在60例ESCC组织中的阳性表达率为60%（36/60），高于正常食管组织0%（0/15），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。Cath-D在中低分化组、侵及肌层组及有淋巴结转移组中的阳性表达率分别为76.47%（26/34）、73.33%（33/45）、89.66%（26/29），高于高分化组、未侵及肌层组及无淋巴结转移组，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 提示ESCC中β-cat的异常表达和Cath-D的阳性表达与肿瘤的浸润和发展有关，联合检测β-cat和Cath-D有可能成为监测ESCC恶性程度和判断预后的重要指标。
【关键词】β-连环素 组织蛋白酶D 食管鳞状细胞癌
中图分类号：R735.1 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）5-059-02
因此本研究采用免疫组织化学方法检测食管癌组织中E-cad、β-cat和Cath-D的表达，研究它们在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系，为探索食管癌侵袭转移的分子机制提供重要依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 选取新疆医科大学第一附属医院2003年6月～2007年7月手术切除并经病理证实ESCC标本60例，其中男33例，女27例，年龄在38～74岁，中位年龄62岁。所有病例术前未经任何放疗和化疗。按照WHO分类标准进行病理分级：高分化26例，中低分化34例。无淋巴结转移31例，有淋巴结转移29例；未侵及肌层15例，侵及肌层45例。同时选取15例正常食管组织（距食管鳞癌原发灶3cm）作对照。以上标本均经临床和组织病理诊断证实。
1.1.2 试剂 β-cat（MAB-0259）、Cath-D（RAB-0029）（福州迈新生物技术开发有限公司）。
1.2 方法 采用免疫组织化学Envision二步法。按试剂盒说明进行操作。染色结果判断：将制好的切片置显微镜下观察，β-cat正常染色位于细胞膜，即连续胞膜染色，异常染色包括胞膜染色降低、消失和异位染色：即出现胞浆、胞核染色。Cath-D以胞质有明显棕黄色颗粒为阳性。
1.3 统计分析 采用SPSS13.0 for Windows统计软件包进行检验及Spearman相关分析，P＜0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 β-cat和Cath-D在正常食管组织和ESCC中的表达情况(见表1、2)
如表1所示，β-cat在15例正常食管粘膜上皮均呈正常表达，细胞膜为棕黄色，胞浆和胞核未见表达；在60例ESCC组织中，β-cat细胞膜表达降低，且部分出现细胞浆阳性异常染色或以细胞浆为主的混合性染色。β-cat在正常食管组织和ESCC组织中的异常表达率分别为0%（0/15）、66.67%（40/60），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
表1β-cat在正常食管组织和ESCC中的表达情况
如表2所示， Cath-D在15例正常食管粘膜上皮中呈阴性表达，而在60例ESCC组织中，癌细胞胞浆和部分间质细胞出现棕黄色颗粒，Cath-D的阳性表达率为60%（36/60），高于正常食管组织0%（0/15），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
表2Cath-D在正常食管组织和ESCC中的表达情况
2.2 β-cat和Cath-D在不同分化程度的ESCC组织中的表达情况
表3β-cat在不同分化程度的ESCC组织中的表达
如表3所示，β-cat在ESCC高分化组中的异常表达率低于中低分化组，β-cat在ESCC高分化组和中低分化组中的异常表达率分别为38.46%（10/26）、88.23%（30/34），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
表4 Cath-D在不同分化程度的ESCC组织中的表达
如表4所示，Cath-D在中低分化组的阳性表达率为76.47%（26/34），高于高分化组38.46%（10/26），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
2.3 β-cat和Cath-D在不同浸润深度的ESCC组织中的表达情况
表5 β-cat在不同浸润深度的ESCC组织中的表达
如表5所示，β-cat在ESCC未侵及肌层组中的异常表达率低于侵及肌层组，β-cat在ESCC未侵及肌层组和侵及肌层组中的异常表达率分别为33.33%（5/15）、77.78%（35/45），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
如表6所示，Cath-D在侵及肌层组中的阳性表达率为73.33%（33/45），高于未侵及肌层组20%（3/15），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
表6 Cath-D在不同浸润深度的ESCC组织中的表达
2.4 β-cat和Cath-D在有无淋巴结转移的ESCC组织中的表达情况
表7 β-cat在有无淋巴结转移的ESCC组织中的表达
如表7所示，β-cat在ESCC无淋巴结转移组中的异常表达率低于有淋巴结转移组，β-cat在ESCC无淋巴结转移组和有淋巴结转移组中的异常表达率分别为48.39%（15/31）、86.21%（25/29），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。
表8Cath-D在有无淋巴结转移的ESCC组织中的表达
如表8所示，Cath-D在有淋巴结转移组中的阳性表达率为89.66%（26/29），高于无淋巴结转移组32.26%（10/31），差异有统计学意义（P＜0.01）。
3 讨论
β-catenin是catenins家族的一种，β-cat基因是一种原癌基因，β-cat在介导Wnt信号传导通路和细胞粘附中起中心分子作用，对肿瘤形成、分化、侵袭及转移中起重要作用 [1]。已有文献报道，β-cat与结直肠癌、乳腺癌、胃癌等多种肿瘤发生有关，胞浆游离的β-cat蛋白水平升高并进入细胞核内是致癌的关键步骤[2-4]。
吴永廉等[6]应用免疫组化SP法检测β-cat在100例食管癌组织中的表达，研究结果表明，β-cat在分化程度低和浸润深的食管癌组织中异常表达率高，淋巴结有转移的比无转移的异常表达率高，且β-cat异常表达者5年生存率低，认为β-cat 异常表达与食管癌浸润转移存在一定关系。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 本研究结果显示，β-cat在正常食管粘膜组、ESCC组中的异常表达率分别为0%（0/15）、66.67%（40/60）， 两组差异有统计学意义（P＜0.01），提示β-cat异常表达可能与食管癌恶性转化有关。本研究显示，胞质和胞核内β-cat异常积聚的癌细胞多集中在癌巢边缘浸润性较强部分，而癌巢中心的癌细胞核内积聚较少，提示边缘细胞中的这种表达方式有利于癌细胞脱离原发灶，并且有利于β-cat参与信号转导，与肿瘤侵袭能力有关。
本研究显示，β-cat在ESCC高分化组和中低分化组中的异常表达率分别为38.46%（10/26）、88.23%（30/34），在侵及肌层组和未侵及肌层组中的异常表达率分别为77.78%（35/45）、33.33%（5/15），差异有统计学意义（P＜0.01），提示β-cat异常表达与ESCC的恶性行为和去分化有一定的相关性，是ESCC获得高增殖活性和侵袭性的原因之一。同时，β-cat在ESCC伴淋巴结转移组和无淋巴结转移组中的异常表达率分别为82.76%（25/29）、41.94%（15/31），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。提示，β-cat异常表达介导Wnt信号传导通路异常激活导致ESCC发生是早期事件，而β-cat异常表达使其与E-cad的亲合性下降，降低该复合体的稳定性，使细胞粘附功能下降，致使肿瘤细胞获得高侵袭、转移潜能，是ESCC发生、发展过程中的晚期事件。β-cat可作为判断ESCC生物学行为的分子标记物，对预测食管癌转移潜能、评价预后、指导临床处理方面有重要意义。
CathepsinD1979年首先由Westleg和Rochefort等发现，它是一种Mr52000的酸性溶酶体蛋白酶，编码Cath-D基因位于染色体11p15[5]。吴凤云等[6]采用免疫组化法对160例乳腺癌标本进行分析，发现Cath-D表达与临床分期、肿块大小和组织学分级有关，提示Cath-D过度表达与乳腺癌细胞浸润性生长存在密切关系。然而Cath-D表达与腋淋巴结转移无明显相关性，认为Cath-D 在影响癌细胞淋巴结转移上作用不大，由于Cath-D对肿瘤血管基底膜具有溶解作用，使肿瘤细胞能够进入血管，故其诱发肿瘤细胞转移的主要途径很可能是血道转移。
本研究显示，Cath-D在ESCC中的阳性表达率为60%（36/60），高于正常食管粘膜上皮0%（0/15），两组差异有统计学意义（P＜0.01）。Cath-D在正常食管粘膜上皮中不表达，而在ESCC中呈过表达，而且多为异质性过表达，肿瘤细胞团边缘带阳性表达增强。提示，此阳性表达特征是ESCC癌细胞在演进过程中逐渐获得，并呈进行性增强，是肿瘤不断形成新的亚克隆细胞群呈异质化的形态表现之一。同时Cath-D通过降低肿瘤抑制因子活性而加快肿瘤细胞的生长。
本研究发现，Cath-D在侵及肌层组中的阳性表达率为73.33%（33/45），明显高于肿瘤未侵及肌层组20%（3/15），说明肿瘤细胞分泌的Cath-D蛋白，有助于肿瘤的局部浸润，促进肿瘤细胞对周围组织的侵袭，加速肿瘤的发展。Cath-D在中低分化组及有淋巴结转移组中异常表达率分别为76.47%（26/34）、89.66%（26/29），分别高于高分化组38.46%（10/26）及无淋巴结转移组32.26%（10/31），经统计学分析，差异均有统计学意义（P＜0.01），提示肿瘤细胞Cath-D阳性表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移有关。肿瘤细胞分化程度越低，Cath-D的表达越高；有淋巴结转移的癌组织Cath-D的表达也明显高于无淋巴结转移组，Kanber等[10]研究也有类似报道。研究发现Cath-D在部分间质细胞亦有表达，提示Cath-D阳性表达可能与ESCC的生长和分化有关，是ESCC演进过程动态变化的形态和功能特征之一；其机制可能与肿瘤细胞分泌Cath D降解基底膜和细胞外基质，促进肿瘤细胞向外侵袭和转移有关。Cath D在部分间质细胞中表达，推测间质细胞可能参与了恶性肿瘤细胞的某些生物学过程。
参考文献
[1]Oloumi A, Mcphee T, Dedhar S. Regulation of E-cadherin expression and catenin/Tcf transcriptional activity by the integrinlinked kinase. Biochim Biophysi Acta, 2004, 1691(1):1-15.
[2] Kawasaki T, Nosho K, Ohnishi M, et al. Correlation of beta-catenin localization with cyclooxygenase-2 expression and CpG island methylator phenotype (CIMP) in colorectal cancer. Neoplasia 2007;9(7):569-577.
[3] Zhang YG, DU J, Tian XX, Zhong YF, et al. Expression of E-cadherin, beta-catenin, cathepsin D, gelatinases and their inhibitors in invasive ductal breast carcinomas. Chin Med J 2007;120(18):1597-1605.
[4] Udhayakumar G, Jauanthi U, Revaraj N, et al. Interaction of MUC1 with beta-catenin modulates the Wnt target gene cyclinD1 in H. pylori-induced gastric cancer. Mol carcinoma 2007;46:807-817.
[5] 吴永廉, 郑建盛, 陈秀娇等. α-cat和β-cat及E-cad在食管癌组织中的表达及其临床意义. 中华肿瘤防治杂志, 2006, 13(10):752-755.
[6] Gaci Z, Bouin-Pineau MH, Gaci M, et al. Prognostic impact of cathepsinD and C-erbB-2 oncoprotein in a subgroup of node-negative breast cancer patients with low histological grade tumors[J]. Int J Oncol, 2001, 18(4): 793-800.
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