清热解毒药配伍桔梗汤对急性肺损伤模型治疗作用的实验观察|清热解毒药配伍健脾药
时间：2019-01-26 04:51:31 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘 要：目的：探讨清热解毒中药配伍桔梗汤对内毒素致急性肺损伤模型大鼠的治疗效果。方法：雄性SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI模型组、清热解毒药组、清热解毒药+桔梗汤组。股静脉注射内毒素脂多糖（LPS）制备ALI大鼠模型，观察各组大鼠肺系数、肺含水量、肺组织MPO含量及病理形态学变化。结果：与生理盐水组相比，ALI模型组大鼠肺系数、肺含水量、肺组织MPO含量均明显升高（P[1]。近年来，许多学者结合现代医学对ALI发病机制的研究新进展，采用辨病与辨证相结合，从热毒论治ALI，显示出良好前景[2-3]。本研究通过建立ALI大鼠模型，模拟其临床发病进程，在应用传统清热解毒中药治疗的基础上，配伍经方桔梗汤，观察ALI大鼠肺系数、肺含水量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量及病理形态学变化，探讨桔梗汤对清热解毒中药的抗炎增效作用，为临床应用提供实验依据。�
1 材料与方法�
1.1动物
健康Sprague�Dawley大鼠，雄性、体重（200±10）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK（京）2002�0003。�
1.2药物与试剂
清热解毒组（由黄芩、栀子等组成），清热解毒药+桔梗汤组（由黄芩、栀子、桔梗、生甘草等组成）。所用中药材均购自北京同仁堂医药药材公司，由北京中医药大学中药教研室鉴定均为正品。生药剂量比例，据文献[4]换算，依照人体单位生药量求得大鼠单位体重生药量，并扩大10倍，制成浓度为1g（生药）/mL的溶液，4℃冰箱保存备用。LPS购自SIGMA公司；MPO检测试剂盒购自南京建成生物有限公司。�
1.3主要仪器
精密电子天平(1/10000)、DY89�F型电动匀浆机、5417R型低温台式离心机、37℃恒温箱、微量加样器、SAFIRE�2型TECAN全波长酶标仪等。�
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 1.4模型制作及分组 给药
按随机数字表法，将大鼠随机分为4组：生理盐水组（9只），每天灌服等体积生理盐水6天，第7天，股静脉注射等量生理盐水；ALI模型组（27只），每天灌服与其他组相应量的生理盐水，清热解毒组（27只）、清热解毒+祛梗汤组（27只）分别提前灌服相应中药6天，第7天，采用一次性股静脉注射LPS（4.9mg/kg）复制大鼠ALI模型。除生理盐水组外，分别于注射LPS后2、4、6h时相腹主动脉取血处死大鼠，每时相9只。�
1.5指标检测与方法�
1.5.1肺组织病理形态学
用10%水合氯醛4mL/kg予大鼠深度麻醉后，每组取3只，用4%多聚甲醛经左心室灌注固定，取右肺下叶继续固定16~18h，常规石蜡包埋，连续作5μm厚切片，HE染色，中性树脂封片，光镜观察。�
1.5.2肺系数 W/D 肺含水量等测定
各时相其余6只大鼠，腹主动脉取血处死，开胸取肺，冰生理盐水冲洗后，用滤纸吸去表面残余液体，称重并记录。取左肺称重后放入烤箱80℃烘烤48h至恒重，计算肺湿重（Wet weight）和干重（Dry weight）。比值即W/D值；肺系数＝肺湿重/体重×100%；肺水含量（百分比）=（肺湿重-肺干重）×100/肺湿重。�
1.5.3肺组织匀浆MPO含量检测
取大鼠右肺下叶，用生理盐水制成20%组织匀浆，采用生化法测定MPO含量。采用每克肺组织酶活性单位表示，1个酶单位表示1min内吸光度（OD）增高1的酶量。严格按照说明书操作。�
1.6统计学方法
采用SPSS11.5软件包分析统计，所有数据均采用均数±标准差（±s）表示，多组均数采用单因素方差分析，组
间两两比较用LSD检验；P[5-6]。研究证实，PMNs于肺内“扣押”所介导的肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞广泛损伤是肺水肿及肺微血栓形成的关键所在[7]。而MPO作为PMNs的标志物，其水平是反应组织PMNs浸润程度的定量指标[8-10]。
目前，现代医学多采用控制感染、治疗并发症及机械通气治疗ALI，但其病死率仍高达50%左右[11]。近10年来，中医药工作者从“肺热证”、“喘证”等角度阐释了ALI的中医学发病机制并广泛应用清热解毒类方药（如双黄连注射液、鱼腥草注射液及清开灵注射液等）进行防治，明显改善了肺通气换气功能[2,12]。但大剂量使用清热解毒药，往往会导致脾胃虚寒，预后不良。故从中药方剂配伍理论出发，探寻具有增效减毒作用的配伍组合，具有现实意义。桔梗汤出自《伤寒杂病论》，具有宣肺开结、排脓解毒之功效。临床上常与清热解毒类药物配伍治疗咽喉部炎症及肺部疾病如肺脓肿、大叶性肺炎、慢性支气管炎等[13-14]。
本实验结果表明，各时相模型组大鼠肺系数、W/D值、肺含水量及肺组织匀浆MPO含量均明显高于生理盐水组，且随时间延长，有加重趋势；肺组织病理形态学显示：肺泡壁增宽，肺泡结构破坏或消失，弥漫性肺泡充血、水肿，大量PMNs浸润；中药干预后肺组织病变明显减轻，各生物学指标及肺组织MPO水平也相应下降（P 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文
