[消�颗粒对于雌激素负荷豚鼠子宫肌瘤的干预及血清性激素水平的影响] 子宫肌瘤是因为雌激素高吗
时间：2019-01-26 04:52:47 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘要：目的：观察消瘢颗粒对于豚鼠子宫肌瘤生长的抑制作用及其血清雌、孕激素水平的影响。方法：采用小剂量雌激素皮下注射法成功建立豚鼠子宫肌瘤模型，观察比较各组豚鼠子宫大体解剖形态学和光镜下病理形态改变。并检测血清雌、孕激素水平。结果：所有模型组豚鼠均出现较明显的子宫平滑肌瘤样改变，其子宫重量、子宫系数、子宫横径、子宫肌壁厚度以及血清雌、孕激素水平均明显大于正常豚鼠；而消瘢颗粒各剂量组对上述指标均有不同程度的改善作用，其中以高剂量组最为明显。结论：消�颗粒对于子宫肌瘤的生长具有一定的抑制作用，同时降低血清雌、孕激素水平可能是其防治子宫肌瘤的主要作用机理之一。
关键词：消瘕颗粒；子宫肌瘤；豚鼠；性激素
中图分类号：R－33 文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2008)07－1452－04
子宫肌瘤是女性生殖系统最常见的良性肿瘤。以30－50岁妇女多见，发病率高达育龄妇女的20％－25％，并呈逐年上升趋势，无症状或未就诊的患者其发病率可高达77％。虽然子宫肌瘤的恶变率极低，但大多数患者都具有十分明显的临床症状，已严重危害妇女的身心健康。目前子宫肌瘤的病因尚未完全明确，但一致认为其与人体过高的雌、孕激素水平密切相关。
消瘢丸(主要由藤梨根、赤芍、水蛭、八月札等组成)是国家级名老中医何任教授在中医学理论指导下，结合自己50余年临床经验总结研制而成。该丸1988－2003年先后在浙江省中医学会门诊部、浙江中医学院附属门诊部应用(1998年批准为医院制剂，批准号为：杭药制剂0540)，经较为完整病例资料统计，总有效率达87.5％，其中治愈率28.13％。显效21.88％，有效37.4％，无效12.5％，与桂枝茯苓丸等作对照观察，疗效明显优于对照组。且安全未见明显毒副作用。本研究将消瘢丸研制开发成颗粒制剂，并通过动物实验探讨其在抑制瘤样增生和降低雌、孕激素水平中的作用，以期为临床更合理的推广应用提供客观的实验依据。
1 材料
1．1 动物 雌性成年未孕豚鼠，(300±20)g，由浙江中医药大学动物实验中心提供。
1．2 实验药物 消瘕颗粒，由浙江中医药大学药剂室提供，每1g颗粒相当于6g生药材；桂枝茯苓胶囊(0.31g/粒)，江苏康源药业股份有限公司，生产批号：060204；苯甲酸雌二醇(2mg/mL)，上海通用药业股份有限公司，生产批号060301；三苯甲氧胺片(10mg/片)，上海医药集团有限公司华联制药厂，生产批号：060602；血清雌激素(E2)、孕激素(P)检测试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司，产品批号：20061220、20061221。
1．3 主要仪器设备 THZ－92台式恒温振荡器，江苏王秀实验仪器厂；TC－30型恒温水浴箱，浙江海宁医药器材厂；XDS－1倒置显微镜系统，重庆光学仪器厂；LD4－2A型低速离心机，北京医用离心机厂；UR－4100型酶标仪，美国Dynatech公司；OLYMPUS－CH普通光学显微镜，日本O－LYMPUS公司；BS200S电子分析天平，意大利Sartorlus；DL－8R冷冻离心机，上海离心机厂。
2 方法
2．1 豚鼠子宫肌瘤模型的建立与给药 雌性成年未孕豚鼠84只，体重(300±20)g，随机分为7组，每组12只，分别为空白对照组(以下简称“空白组”)、模型对照组(以下简称“模型组”)、消�颗粒高剂量组(以下简称“消高组”)、消瘢颗粒中剂量组(以下简称“消中组”)、消瘕颗粒低剂量组(以下简称“消低组”)、桂枝茯苓胶囊组(以下简称“桂茯组”)、三苯氧胺组(以下简称“三氧组”)。参考文献[2]的豚鼠子宫肌瘤造模方法，除空白组每3天注射生理盐水0.1mL/只外，其余各组均每3日皮下注射1次苯甲酸雌二醇0.1mL/只(相当于0.1mg/只，注射前用大豆油稀释)连续16周。
第9周起，模型组、空白组每天灌服蒸馏水4.5mL/只；消高组按消瘕颗粒5.6g/kg(相当于成人剂量的10倍)灌胃；消中组按消瘕颗粒2.8g/kg(相当于成人剂量的5倍)灌胃；消低组按消瘕颗粒1.6g/kg(相当于成人剂量的3倍)灌胃；桂茯组给予桂枝茯苓胶囊0.5g/kg(相当于成人剂量的5倍)灌胃；三氧组给予三苯甲氧胺片0.25mg/kg(相当于成人剂量的5倍)，以上均加蒸馏水配置成悬浊液，且灌胃量为4.5mL/(只・天)，持续8周。因实验周期长造成意外死亡，灌胃结束时豚鼠剩余61只。
2．2 处理 第16周末，将所有豚鼠用3％戊巴比妥钠1.5mL/kg麻醉，腹主动脉取血，分离血清，采用双抗体夹心ELISA法测定血清E：与P的含量，具体步骤参照试剂盒说明书进行。剖腹观察子宫大体形态，沿子宫膀胱连接处剪取子宫，称重，计算子宫系数(子宫重/100g体重)，用游标卡尺量取子宫颈以上及分角子宫根部横径。将子宫置于4％福尔马林中固定，于子宫分角以上相同部位横切取材0.5cm，每侧取材2块，石蜡包埋，HE染色，光镜下观察子宫组织病理学变化。每张切片选取5个部位，在10×10镜下以显微测微尺测量子宫平滑肌厚度，取平均值。
2．3 统计学方法 所有结果用SPSS13.0软件进行处理，所测数据以均数±标准差表示，采用单因素方差分析多重组间比较方法，P＜0.05为有统计学意义。
3 结果
3．1 豚鼠子宫形态学的变化 见表1，图1－5。 3．2 消�颗粒对豚鼠子宫重量的影响 由表2可以看到：(1)子宫重量方面，模型组子宫体重增加，与空白组相比。差异非常显著(尸＜0.01)；各治疗组子宫重量均明显低于模型组，其中以消高组、三氧组最为明显(P＜0.01)，并且疗效优于桂茯组，差异具有显著性(P＜0.05)。(2)子宫系数方面，各治疗组均明显低于模型组，三氧组降低最为明显，与桂茯组相比，有统计学意义(P＜0.05)。消癜胶囊各治疗组从数据上看虽优于桂茯组，但未能达到统计学意义。
3．3 消�颗粒对豚鼠子宫横径变化的影响 由表3可以看到：空白组和各治疗组的子宫分角下横径、左分角横径、右分角横径均明显小于模型组，差异具有显著性(P＜0.01或P＜0.05)；其中消高组的右分角横径小于桂茯组，且具有统计学意义(P＜0.05)。
3．4 消瘢颗粒对豚鼠子宫平滑肌厚度变化的影响 由表4可以看到：模型组子宫平滑肌较空白组明显增厚(P＜0.01)；各治疗组子宫平滑肌厚度亦较模型组薄，且均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)。
3．5 消�颗粒对豚鼠血清性激素水平的影响 由表5可以看到：(1)雌激素方面，模型组明显高于空白组，差异具有非常显著性(P＜0.01)，表明造模豚鼠体内存在高雌激素的病理状态。而各治疗组雌激素水平均明显低于模型组 (P＜0.01)，其中消高组、三氧组、消中组效果最佳，并且优于桂茯组(P＜0.01或p＜0.05)；(2)孕激素方面，空白组与各治疗组的孕激素水平均明显低于模型组(P＜0.05或P＜0.01)，表明造模豚鼠体内同时还存在高孕激素的病理状态，其中消高组、三氧组、消中组孕激素降低最为明显，与桂茯组相比，差异具有显著性(P＜0.01)。
4 讨论
子宫肌瘤主要为子宫平滑肌细胞增生而形成，目前国内外文献报道较为经典的豚鼠子宫肌瘤模型建立方法多参照1995年的Fujii法，但该法的研究结果显示单独给予豚鼠雌激素3次/周，2－6个月后，豚鼠腹腔如脾、腹膜、胰腺以及子宫角，出现的是弥漫性纤维瘤，需在应用雌激素后同时联合应用孕激素才能诱导纤维瘤转化为平滑肌瘤。这显然不符合人类子宫肌瘤的发病过程。故本实验参考了最近有关豚鼠子宫肌瘤模型成功的研究报道，所不同的是采用未去势的成年雌性豚鼠，以更好地模拟人类子宫肌瘤发病过程。病理研究结果显示：经每3天给予皮下注射苯甲酸雌二醇0.1mL/只，16周后模型组所有豚鼠均出现较明显的平滑肌瘤样改变，具体如表1所述。而空白组豚鼠子宫肉眼与镜下观察均无异常改变，证明本实验的子宫肌瘤模型是成功的，并且在形态与病理组织学上与人的子宫肌瘤相似。
子宫肌瘤属于祖国医学“瘕瘕”、“积聚”、“石瘕”等范畴，其最主要的病机乃气滞、血瘀、寒凝。消瘕颗粒是国家级名老中医何任教授根据汉代名医张仲景的经典方，结合自己50余年经验总结研制而成，经数十年的临床观察验证，对于子宫肌瘤、卵巢囊肿确有着良好的疗效。该方由藤梨根、水蛭、赤芍、八月札等组成，主要具有理气活血、温经通络、破瘀消�等功效。本实验研究结果显示，模型组豚鼠的子宫重量、子宫系数、子宫分角下及左右子宫分角横径、子宫平滑肌壁厚度均明显大于空白组豚鼠，而消瘕颗粒各剂量组豚鼠的上述指标与模型组相比具有显著性差异，尤以高剂量组对子宫肌瘤的生长抑制作用最为突出。目前，长期、大量的雌激素刺激普遍被认为是子宫肌瘤发生的主要因素，近年来的研究还表明孕激素在肌瘤的发生过程中亦起着重要作用。本实验研究结果进一步证实子宫肌瘤具有明显的雌孕激素依赖性：与正常组相比，造模豚鼠体内存在着高雌激素与高孕激素环境，其中雌激素水平显著升高(P＜0.01)，孕激素水平也有一定程度的升高(p＜0.05)。各治疗组均能使造模豚鼠体内雌、孕激素水平下降，桂枝茯苓胶囊组虽能降低以上两种激素水平，但不及消瘕颗粒高中剂量组、三苯氧胺组明显，差异具有统计学意义。这与以往有关“桂枝茯苓胶囊治疗子宫肌瘤具有弱抗雌激素的特性，可降低血液中雌二醇、孕酮”的报道是一致的。相比而言，消�颗粒则具有较强的抗雌、孕激素作用，并且呈一定的量效关系。可见，同时降低体内雌孕激素水平可能是消�颗粒抗子宫肌瘤的主要作用机制之一。然而，消�颗粒防治子宫肌瘤的作用机理应该是多方面的，其他诸如血循环、细胞免疫等方面的作用机理，尚有待进一步地深入研究。
