利福昔明干混悬剂【ＨＰＬＣ法测定利福昔明干混悬剂中利福昔明的含量】
时间：2019-01-11 04:23:03 来源：达达文档网 本文已影响 人 
[摘要] 目的：建立高效液相色谱法测定利福昔明干混悬剂中利福昔明的含量限度的方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Kromasil C8，甲醇-乙腈-0.075 mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0 mol/L枸橼酸溶液（50∶22.5∶22.5∶5）为流动相，流速为1.0 ml/min，检测波长为240 nm。结果：利福昔明在41.02～164.08 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.999 97），平均回收率为99.79%，RSD为1.30%，规定含量限度为90.0%～110.0%。结论：本法准确、灵敏、可靠，能有效地控制该制剂的质量。
[关键词] 利福昔明；利福昔明干混悬剂；高效液相色谱法
[中图分类号] R927.2[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）12（b）-027－０2
Determination of rifaximin in Rifaximin Dry Suspension by HPLC
SHANG Shi-guang
(Department of Chemistry, the Affiliated Health School of Shenyang Medical College, Shenyang110034, China)
[Abstract] Objective: To establish a method for the determination of rifaximin in Rifaximin Dry Suspension by HPLC.Methods: HPLC was used, the chromatographic column was Kromasil C8 , with the methyl alcohol-methyl cyanide -0.075 mol/L potassium dihydrogen phosphate solution-1.0 mol/L citron acid solution(50∶22.5∶22.5∶5) as the mobile phase, the flow rate was 1.0 ml/min, the detective wavelength was set at 240 nm. Results: The calibration curve of rifaximin was linear at the range of 41.02-164.08 μg/ml(r=0.999 97), the average recovery was 99.79%, RSD=1.30%, the content limit was 90.0%-110.0%. Conclusion: This method is accurate, sensitive and reliable, it can be used for the quality control of this preparation effectively.
[Key words] Rifaximin; Rifaximin Dry Suspension; HPLC
利福昔明是利福霉素衍生物，是一种高效低毒的肠道抗生素，适用于革兰阳性菌及阴性菌、需氧及厌氧细菌所致急慢性肠道感染等症及术前、术后肠道预防用药。由于其不溶于水，生物利用度低，将本品制成干混悬剂型，具有服用方便、药物溶出快、疗效高等特点。制备工艺及生产设备可同于普通片剂，因此可有较好的临床应用前景。
１仪器与试药
LC-6A型高效液相色谱仪（岛津）；SPD-6AV紫外检测器（岛津）；Kromasil-C8色谱柱（瑞典NobelLEka生产）。
利福昔明对照品（自制，购于浙江思贤制药有限公司原料，批号2005-09-19，经乙醇－水３次重结晶制得，含量为98.0%）；福昔明干混悬剂，醌式利福昔明（本室自制，批号：20051021，
20051022，20051023，20051025，20051028）。
２方法与结果
2.1色谱条件
Kromasil-C8色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：甲醇-乙腈-0.075 mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0 mol/L枸橼酸溶液（50∶22.5∶22.5∶5），检测波长为240 nm，流速1.0 ml/min，柱温15～20℃。
2.2标准溶液的制备
精密称取利福昔明对照品0.2 g，加入5 ml甲醇使其溶解并稀释到100 ml，精密量取0.6，0.8，1.0，1.2，1.5，2.0 ml分别加流动相稀释到25 ml，摇匀备用。
2.3福昔明干混悬剂与醌式利福昔明的制备
处方组成为利福昔明1.200 g、微晶纤维素0.070 g、羧甲基纤维素钠0.710 g、果胶0.780 g、白陶土4.002 g、糖精钠0.060 g、苯甲酸钠0.036 g、蔗糖17.280 g，桔子香精0.240 g。将原料药粉碎，过180目筛，辅料（除蔗糖外）均过80目筛。按处方量称取利福昔明、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、果胶、白陶土混合均匀即得干混悬剂。取50 mg利福昔明，溶于50 ml甲醇中，搅拌加入300 mg的二氧化锰，室温下搅拌96 h后，过滤除去二氧化锰，经TLC检测，没有利福昔明斑点时，反应结束即得醌式结构，将本品放入棕色玻璃瓶中，于阴暗处放置备用。
2.4标准曲线的绘制
按“2.1”项下的色谱条件，取“2.2”项下的标准溶液分别进样，测得的结果见表1。
表1 利福昔明标准曲线
将浓度与峰面积进行线性回归，得回归方程为A=2.26×102+1.93×107C（r=0.999 2），结果表明，利福昔明在41.02～164.08 μg/ml范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.5稳定性试验
取“2.2”项下的标准溶液于不同时间进样，每次20 μl，在室温下放置12 h分别在0、2、4、8、12 h取样测定，其平均峰面积为1 473 250，表明本品在甲醇-乙腈-0.075 mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0 mol/L枸橼酸溶液中稳定。结果表明利福昔明溶液在12 h内是稳定的。
2.6精密度试验
精密称取利福昔明对照品0.2 g，精密称定6份，分别加5 ml甲醇使其溶解并稀释到100 ml，精密量取1.0 ml，分别加流动相稀释到25 ml摇匀，分别进样，每样20 μl，结果见表２。
表2 利福昔明精密度试验结果
峰面积RSD=0.56%，结果表明，本方法精密度较好。
2.7回收率试验
精密称取利福昔明对照品160、200、240 mg各3份，按照“2.3”项下干混悬剂制备（利福昔明除外）的比例分别加入相同量的辅料混匀置于100 ml量瓶中，加入甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液1 ml置于25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，对照含量测定项下方法测定，求得总平均值，计算回收率，结果见表３。
表3 利福昔明回收率试验结果
结果表明，该方法的回收率的ＲＳＤ＝1.30%，回收率良好。
2.8样品含量测定
精密称取利福昔明干混悬剂1.623 g，置100 ml容量瓶中，加入甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液5 ml置50 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，照高效液相色谱法中（《中国药典》2005年版二部）方法测定，取20 μl注入液相色谱仪中，记录色谱图。另精密称取于105℃干燥至恒重的利福昔明对照品0.800 g，置100 ml容量瓶中，加入甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5 ml置50 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算，结果见表４。
表4 利福昔明干混悬剂样品含量测定结果
依据试验结果，规定含量限度为90.0%～110.0%。
3讨论
试验初期，我们曾采用甲醇-0.075 mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0 mol/L枸橼酸溶液（60∶26∶4）为流动相，样品得不到较好的分离，最终我们高效液相色谱法色谱条件：色谱柱为Kromasil C8，甲醇-乙腈-0.075 mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0 mol/L枸橼酸溶液（50∶22.5∶22.5∶5）为流动相，流速为1.0 ml/min，检测波长为240 nm，利福昔明在41.02～164.08 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 97），平均回收率为99.79%，RSD为1.3０%。根据试验结果，最终确定本品的含量限定值为标示量的90.0%～110.0%。该方法准确、灵敏、可靠，能有效地控制该制剂的质量，可作为该制剂含量测定的检测方法。
[参考文献]
[1]张兵.RP-HPLC测定利福昔明的含量及有关物质[J].华西药学杂志,2003,18(4):281.
[2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005.附录ⅤD.
[3]吕洁,孟祥军,邹春阳,等.高效液相色谱法测定美诺平胶囊中丹参素的含量[J]. 中国中医药杂志,2007,5(6):6-10.
（收稿日期：2008-08-18）
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