神经节苷脂 [神经节苷脂联合尼莫地平对脑缺血半暗带细胞凋亡及凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响]
时间：2019-01-23 04:41:24 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘要：目的 观察神经节苷脂GM1联合尼莫地平治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响。方法 36只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、 药物治疗组。线栓法制备大脑中动脉Bcl-2/Bax缺血再灌注模型（MCAO模型），缺血2 h再灌注6 h，12 h，24 h，72 h。采用TUNEL法检测神经细胞凋亡，免疫组织化学法染色检测Bcl-2、Bax蛋白，并进行统计学分析。结果 与模型组比较，药物治疗组神经细胞凋亡计数随再灌注时间的延长显著减少（P［1］。而尼莫地平为二氢吡啶类钙通道阻滞剂，减少Ca2+内流，提高缺血区局部脑血流量。氧自由基的产生可诱导细胞发生凋亡［2］，尼莫地平可降低脑缺血再灌注后脑组织中NO含量［3］，从而减少了NO介导的神经损伤作用，即减少了对Bcl-2表达的损伤，从而抑制了神经细胞凋亡，减轻缺血性损伤，起到神经保护作用。本实验观察了腹腔注射神经节苷脂GM1和尼莫地平后，发现缺血侧皮层凋亡细胞数显著减少，与模型组对比，有统计学意义。药物治疗干预后，对神经细胞可能有保护作用。
细胞凋亡的发生取决于促凋亡蛋白和抑凋亡蛋白浓度。Bcl-2和Bax是Bcl-2家族中两类典型的抑凋亡蛋白和促凋亡蛋白，发生凋亡时，Bcl-2家族蛋白通过成员间的异二聚化、磷酸化、蛋白水解等方式，最终定位于线粒体膜引起膜通透性的改变［4］，并和Bax通过形成异源二聚体时，实现Bcl-2抑制细胞凋亡的功能。Bcl-2的这种神经保护作用主要依赖于他对凋亡的抑制。本组试验，假手术组皮层Bcl-2和Bax只有少量表达，而模型组缺血侧皮层Bcl-2和 Bax表达明显增多,Bcl-2蛋白在缺血早期表达明显上调，至再灌注12 h达高峰，此时，Bcl-2/Bax比值达到高峰，以后逐渐下降，表明缺血再灌注最初阶段，Bcl-2蛋白发挥着细胞保护作用，但随着时间的延续，凋亡级联反应出现，细胞受损加重，Bcl-2蛋白降解增加，表达逐渐下降；促凋亡蛋白Bax表达在缺血在缺血早期表达逐渐上调，24 h达高峰。当Bax形成同源二聚体时诱导细胞凋亡，Bax通过并从胞浆向线粒体转位［4］。其时间与空间的分布与TUNEL阳性神经元一致。干预治疗后脑缺血再灌注6 h～24 h，对大鼠脑组织缺血侧皮层Bcl-2的促表达作用明显增强， Bax表达明显减少，至再灌注12 h Bcl-2/Bax比值达高峰，提示干预治疗后抗凋亡的脑保护作用不仅与上调Bcl-2表达有关，同时还与下调Bax表达有关。
神经节苷脂GM1联合尼莫地平干预治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤后缺血侧Bcl-2/Bax比值皮层凋亡相关蛋白Bcl-2上调、Bax蛋白下调，对缺血半暗带细胞抗凋亡作用，可能成为挽救濒死细胞最直接有效的方法，起到脑保护作用。
参考文献:
［1］ Xu XH,Zhang SM,Yan WM,et al.Development of cerebral infarction,apoptotic cell death and expression of X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein following focal cerebcal ischemia in rats［J］.Life Sci,2006,78：704-708.
［2］ Harper N,Hughes M,Farlane M,et al.Fas-associated death domain protein and caspase-8 are not recruited to the tumor necrosis factor receptor 1 signaling complex during tumor necrosis factor induced apoptosis ［J］.J Biol Chem,2003,278（28）:25535-25543.
［3］ Roset R,Ortet L,Gomez G.Role of Bcl-2 family members on apoptosis:What we have leaened from knock-out mice［J］.Front Biosci,2007,12（20）:4722-4727.
［4］ Lalier L,Cartron PF,juin P,et al.Bax activation and mitochondrial insertion during apoptosis［J］.Apoptosis,2007,12（5）:887-894.
作者简介：杨慧芬（1957―），女，毕业于河北大学，副主任医师，现工作于河北北方学院附属第一医院（邮编：075000）；潘妍婷，工作于河北北方学院附属第一医院。
（收稿日期2011-04-22）
（本文编辑 王雅洁）
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