枸杞的组织培养技术
时间：2021-01-22 10:04:23 来源：达达文档网 本文已影响 人 
陈淑华 刘冬梅 冷志巍 叶雅玲
本文对宁杞1号进行了组织培养实验，实验结果显示，适合枸杞的初代分生培养基为MS+6-BA0.1 +IAA0.5苗的质量最好;用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2继代效果最好;生根培养基 1/2MS+NAA0.01+IAA0.3为最佳，生根率达到90%以上。
枸杞（lycuon chinense）又名枸杞子、红果子，茄科多年生落叶灌木，高0.8-2米，多分枝。我国各地均有栽培，主要分布于甘肃、青海等地。果实甘甜，可直接食用性滋补润肺。近年来枸杞又发展为保健饮料和食品的加工原料，枸杞的需求量日益增加。本试验采用组织培养扩繁，具有原材料节省、遗传性稳定、繁殖系数高等优点。
一、试验材料及方法
1、试验试材
采用结实量大、色泽鲜红、果肉口感好的枸杞优株树上的嫩茎尖作外植体。
2、配置培养基
试验采用改良的MS配方为基本培养基，并附加植物激素（8种对比）配好后装瓶121℃～126℃条件下灭菌15㏕。
3、外植体灭菌与接种
将外植体浸入吐温浸泡15～25min，自來水冲洗至无泡，移至超净台中切成2～3㎝小段，浸入75%酒精3～5s，再用0.1%Hgcl2液浸泡4～10min，并不断搅动，无菌水清洗4～5次，最后将小段两端各剪掉一部分，用无菌滤纸吸干表面水分接种，每瓶一块外植体。
4、培养基和培养条件
采用改良的MS﹙大量元素为原来的3/4﹚，诱导丛生芽培养基含蔗糖2.8%，生根培养基含蔗糖1.5%，所有培养基中均含琼脂0.5% PH6.4。高压灭菌30min，培养温度25～28℃，光照周期16/8h，光照强度1500～1600lux，培养室湿度55%～70%。
二、结果和分析
1、不同激素组合对芽诱导的影响
将试材接种于3/4MS培养基，附加蔗糖28mg/L，如表1所示激素配比，5d左右分化愈伤，1周后外植体开始分化。
2、不同激素组合对宁杞1号芽分化阶段的影响
将丛生芽在切割成小试材接种于下列几种培养基中，试验在不同浓度配比外加激素NAA、与 6-BA时，对宁杞1号继代增殖的影响。
在未染菌的试材中选出的粗壮的单芽切下，转接到以上8种培养基中，每瓶2株，每种组合接10瓶。
三、结论与讨论
1、初代培养
由表1可以看出，在不同的激素组合中，MS+6-BA0.3+IAA0.5的启动天数最短，为5d但初代分生玻璃化现象严重，苗无法继续使用，放弃;6-BA0.3+NAA0.04和6-BA0.3+IAA0.3两种激素组合启动天数为6，但都有玻璃化现象伴随，苗无法继代使用，放弃;综合8种激素组合对比，6-BA0.1+IAA0.5愈伤组织较多，丛生芽粗壮，为最佳的初代分生培养基。
2、继代增殖
由表2的结果分析得出，枸杞继代培养中，当6-BA的浓度在0.1mg/L、0.3mg/L同一浓度水平时随着NAA浓度的增加，丛生芽增加，愈伤组织增多，但NAA达到0.05以后，出现玻璃化现象;当6-BA浓度在0.3mg/L以下时，NAA浓度越大，丛生芽的数量越多，其中4号培养基中的苗高度小，侧芽分生更少;实验表明，用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2培养基比较适合枸杞的继代培养。
3、生根培养
如表所示，用3号培养基进行生根培养只需10天，而且根粗壮，生根率达到90%，2号培养基虽8d出根，但根细弱;而1号培养基15天出根，生根率为75%～85%，综合试验，生根培养基为1/2MS+NAA0.01+IAA0.3为最佳培养基。
综上所述，宁杞1号初代分生培养基为MS+6-BA0.1+IAA0.5分生率最高，苗的质量最好;用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2继代效果最好，生根培养基中1/2MS+NAA0.01+IAA0.3培养基为最佳，生根率达到90%以上。
（作者单位：137000 吉林省白城市林业科学研究院）
