应用Bc2300全自动血细胞分析仪对白细胞减少的动物实验研究
时间：2021-04-23 07:54:09 来源：达达文档网 本文已影响 人 
打开文本图片集
【摘 要】目的：探讨应用Bc2300全自动血细胞分析仪对白细胞减少的动物实验研究的效果。方法：实验方法将60只小鼠随机分成4组：空白对照组、模型组、西药组、中药组。正常喂养3天后，除空白对照组外其余各组均腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，1次/天，连用3天造模，断尾取血测白细胞总数。造模完成后，第二天开始灌胃。前两组用，后两组分别用鲨肝醇、补血汤，按0.3ml/l0g，1次/天。连续用药7天。结果：空白对照组小鼠毛发正常，皮肤无松弛，活动正常，精神正常，活跃，食欲旺盛;模型组小鼠精神萎靡，食欲低下，运动少，嗜睡;生白方组与阳性对照组造模后同模型组，灌胃3天后情况改善，到灌胃第7天小鼠毛发有光泽，皮肤恢复弹性，活泼好动，嗜睡减轻。食欲增长，大便干湿适中。模型组小鼠前后一般情况无显著性变化。结论：应用Bc2300全自动血细胞分析仪对白细胞减少的动物实验研究的升高白细胞效果显著，实验室诊断率高。
【关键词】白细胞减少;Bc2300全自动血细胞分析仪动物实验
【中图分类号】R446.111 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）07-0022-01
近年来采用的粒细胞集落因子虽有一定疗效但价格昂贵、副反应大，限制了药物的推广。中医药治疗化疗毒副反应有其独到之处，弥补了西医疗法的不足，有些作用又是西药达不到的。所以充分发挥中医特色，与化疗紧密配合，则会明显减少化疗毒副反应，顺利完成抗癌治疗。为探讨其升高白细胞的具体环节及机理，为临床应用提供科学依据，现将动物实验情况研究如下。
1 材料和方法
1.1实验动物 昆明种二月龄小鼠60只，体重20±2g，雌雄各半。
1.2药品与试剂 补血汤：天门冬10g，墨旱莲9g，女贞子10g，制鳖甲12g，阿胶12g，熟地10g，白芍9g，人参10g，白术15g，枸杞子10g等十味药物由我院提供，经中药药理学实验室评价符合《中药评价学》[1]要求;SICAM-1试剂盒（Endogen）由南京建成生产，批号：2017419;环磷酰胺注射剂由上海华联制药有限公司，生产批号：2017306;鲨肝醇由广东市桥制药厂生产，批号：170309。
1.3补血汤制备方法 中药先用蒸馏水浸泡30min，武火煮至药沸后，文火煎2次，每次60min，合并2次煎液，6层纱布过滤，800c恒温水中浓缩为50ml，浓度为1.0g生药/ml，冰箱贮存，用时水浴加热。
1.4环磷酰胺制备方法 按文献记载[2，3，4]，用生理盐水配制成浓度为10mg/ml的混悬液，冰箱贮存备用。
1.5 鲨肝醇片配制方法 按文献记载[2，3，4]，用生理盐水配制成浓度为lmg/ml的混悬液，冰箱贮存备用。
l.6仪器 迈瑞Bc2300全自动血细胞分析仪;721分光光度计（上海第二分析仪器厂生产）;恒温箱;G1218A高速离心机（江苏医疗器械厂生产）;电动匀浆机，微量天平;秒表等。
1.7实验方法将60只小鼠随机分成4组：空白对照组、模型组、西药组、中药组。正常喂养3天后，除空白对照组外其余各组均腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，1次/天，连用3天造模，断尾取血测白细胞总数。造模完成后，第二天开始灌胃。前两组用，后两组分别用鲨肝醇、补血汤，按0.3ml/l0g，1次/天。连续用药7天。
1.8检测指标及方法 灌胃7天后，于第8天，将各组小鼠全部称重，取眶后静脉窦血测WBC及SICAM-1。眶动脉和眶静脉取血l ml后，棉球压迫止血，测定血清SICAM-1含量（按说明书进行）;做小鼠抗疲劳实验，每只小鼠尾部坠一2g重物，在40×30 ×20cm3玻璃容器，20℃水温下进行游泳实验，秒表计时，至小鼠浸入水下l0s不能上浮为止，记录数据。解剖小鼠，取出胸腺和脾脏，生理盐水洗净，滤纸吸净血液。用微量天平测胸腺和脾脏重量，计算胸腺指数和脾脏指数。计算公式为：胸腺指数（脾脏指数）=胸腺mg（脾脏mg）/小鼠体重（g）。
1.9统计学方法 研究数据均以（x±s）表示，使用SPSSl3.0软件包进行统计学处理。
2 结果
2.1 各组小鼠一般情况 空白对照组小鼠毛发正常，皮肤无松弛，活动正常，精神正常，活跃，食欲旺盛;模型组小鼠精神萎靡，食欲低下，运动少，嗜睡;生白方组与阳性对照组造模后同模型组，灌胃3天后情况改善，到灌胃第7天小鼠毛发有光泽，皮肤恢复弹性，活泼好动，嗜睡减轻。食欲增长，大便干湿适中。模型组小鼠前后一般情况无显著性变化。
2.2各实验数据及分析 见表l，表2。
表l小鼠外周血白细胞含量的比较（x±s）
表2 小鼠血清SICAM-1含量及对胸腺指数、脾脏指数的影响（x±s）
3 讨论
白细胞减少症（1eukopenia）为常见血液病。属中医虚劳范畴。中医理论认为：脾为后天之本，气血生化之源;腎为先天之本，“血之源头在乎肾”。且肾又主骨、生髓、藏精，肾中精气是生命活动之根本。对经络脏腑气血等功能的正常发挥有着重要作用。脾肾亏虚、气血不足，则会产生头晕、乏力、纳差、倦怠、易感冒等一系列虚证表现，近年来的研究显示[5，6]，脾虚、肾虚、气虚、血虚等与机体免疫功能相关，表现免疫功能低下。临床常把放化疗引起的毒副反应自细胞减少归结为脾肾亏虚气血不足，按中医辨证施治原则，而组方的补血汤切中病机，
本实验结果显示，补血汤对造模后白细胞降低有明显改善作用。血清SICAM-1含量、胸腺指数、脾脏指数、游泳时间较模型组均有显著性差异。补血汤在胸腺指数方面较西药组有显著性差异。
白细胞减少症，与造血抑制和白细胞SIClAM-l功能失调密切相关，益气补血、调和阴阳的中药补血汤能促进WBC恢复和降低SIClAM-l水平，这可能是该药对白细胞减少治疗作用的重要机理之一，这种作用对于肿瘤患者免疫防御能力的提高，抑制肿瘤细胞的淋巴转移均有重要意义。
参考文献
[1]祝红焰，谭允育.八珍汤对60Co照射小鼠细胞及相关细胞因子影响的实验研究[J].中国免疫学杂志，2000.16（2）：52-53
[2]粱毅.地甘口服液对环磷酞胺致低白模型小鼠免疰功能的调节作用[J].中国中医科技.2000，7（3）：16l-162
[3]郭鸣放.消瘤丸对小鼠放、化疗后的减毒作用[J].河北医科大学学报.2000，（1）：10
[4]粱毅.血虚证免疫功能变化规律的临床与实验研究[J].中国实用中西医结合杂志，1998.11（11）：631-632
[5]王运平.脾虚小鼠免疫功能的探讨[J].中国中西医结合脾胃杂志.1998，6（1）： 34-36
