厚朴三物汤饮片汤剂与其配方颗粒汤剂厚朴酚含量比较_厚朴饮片
时间：2019-01-26 04:51:48 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘 要：目的：比较厚朴三物汤饮片汤剂与其配方颗粒汤剂中厚朴酚含量。方法：采用 Shim-pack VP-ODS（250mm×4.6mm，5μm）为色谱柱；流动相为甲醇－1%醋酸溶液(80∶20)；检测波长为294nm；流速为1.0mL/min；柱温为40℃；峰面积外标法定量。结果：配方颗粒汤剂中厚朴酚平均含量为0.1191mg•mL-1，RSD为19.58%(n=3)；饮片汤剂中厚朴酚平均含量为0.0753mg•mL-1，RSD为100.1%(n=3)。结论：厚朴三物汤配方颗粒汤剂与饮片汤剂的色谱图基本一致,配方颗粒汤剂中厚朴酚含量比饮片汤剂高，而且配方颗粒汤剂较饮片汤剂稳定，相对容易控制质量，更有优越性。�
关键词：厚朴三物汤；配方颗粒汤剂；饮片汤剂；高效液相色谱法；厚朴酚
中图分类号：R285.5文献标识码：A
文章编号：1673-7717(2008)05-1046-03�
Comparison the Content of Magnolia between Slice Decoction and �
Dispensing Granule Decoction of Houpu Sanwu Decoction
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XIAO Yu�yan�1,SONG Jian�feng�2,WENG Jin�yue�3,CAI Jin�zhang�4,FAN Jian�shuang�5，ZHANG Cheng�chuan�6�
(1.Ruian Hospital of Traditional Chinese Medicine,Ruian 325200,Zhejiang,China;2.Quzhou Institute for Drug Control,Quzhou 324002,�
Zhejiang,China;3.The Second People"s Hospital of Wenzhou, Wenzhou 325000,Zhejiang,China;4.The Second Affiliated Hospital of �
Wenzhou Medical College,Wenzhou 325000,Zhejiang,China；5.Wenzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine ,�
Wenzhou 325000,Zhejiang,China；6.Yueqing Hospital of Traditional Chinese Medicine ,Yueqing 325600,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To compare the content of Magnolia between slice decoction and dispensing granule decoction of Houpu Sanwu decoction.Methods:An HPLC method was used .The detection wavelength was 294nm. Shim-pack VP-ODS (250mm×4.6mm,5μm)column was used.The mobile phase was a solution of MeOH-1% HAc (80∶20);column temperature was setup at 40℃ and the flow rate was 1.0mL/min;external method was used.Results:The average content of Magnolia in the granule decoction was 0.1191mg•mL-1，the RSD was 19.58%(n=3);and in the slice decoction it was 0.0753mg•mL-1，the RSD was 100.1%(n=3).Conclusion:The HPLC chromatograms are similar in two forms of Houpu Sanwu decoction.The content of Magnolia in dispensing granule decoction is higher than that in slice decoction,Moreover the dispensing granule decoction is more stable and easier for the quality control.
Keywords:Houpu Sanwu decoction;dispensing granule decoction;slice decoction;HPLC;magnolol
汤剂为传统中药剂型，至今在我国已有数千年的应用史，也是临床最常用的中药剂型之一，但其有煎煮麻烦费时、服用量大、携带不方便等不利因素，越来越难以适应现代社会快节奏的生活方式及临床需要。将单味中药采用现代工艺经提取、浓缩、干燥精制而成的中药配方颗粒，具有服用量少、携带方便、剂量准确、药物稳定、便于储存等优点，是近年来中药现代化、规范化、标准化迈进的新产物、新剂型，但尚处于验证、试点阶段，其临床疗效有待进一步考察。厚朴三物汤源自《金匮要略》，由姜厚朴、生大黄、炒枳实组成，具行气除满之功，适用于里实气滞之证，可以治疗麻痹性肠梗阻等症，临床应用十分广泛[1]。方中重用厚朴为君药，其意重在“行气”[2]，而厚朴酚为厚朴主要成分，故选用厚朴酚作为其指标性成分来考察、研究。本试验通过对其传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中厚朴酚的含量进行测定，比较是否存在差异，以探讨中药配方颗粒在中药复方配伍中应用的可行性[3]。现报道如下。�
1 仪器与试剂
日本岛津LC―2010 A高效液相色谱仪，自动进样系统；Lcsolution Version 1.11 SP1色谱数据工作站；日本岛津UV-2450紫外分光光度计；KQ－250B型超声波清洗器（功率：250W，频率：40KHz）。YFY13型电煎密闭煎药机，北京东华原医疗设备有限公司。甲醇、氯仿为色谱纯；水为重蒸馏水；厚朴酚对照品（批号：0729―200107，供含量测定用），由中国药品生物制品检定所提供。姜厚朴中药配方颗粒（市售，批号：0512011①号组、0607011②号组、0608011③号组，规格：每袋装1g，相当于饮片3g），姜厚朴饮片（市售，批号：060829④号组、060920⑤号组、070731⑥号组）；炒枳实中药配方颗粒（市售，批号：0507011①号组、0605015②号组、0610081③号组，规格：每袋装1g，相当于饮片6g），炒枳实饮片（市售，批号：060926④号组、070426⑤号组、070524⑥号组）；大黄中药配方颗粒（市售，批号：0508107①号组、0604031②号组、0608013③号组，规格：每袋装3g，相当于饮片3g），大黄饮片（市售，批号：060914④号组、070709⑤号组、070502⑥号组）。�
2 色谱条件
色谱柱：Shim-pack VP-ODS（250mm×4.6mm，5μm）为色谱柱；甲醇－1%醋酸溶液(80∶20)；检测波长为294nm；流速为1.0mL/min；柱温为40℃；峰面积外标法定量。�
3 方法与结果�
3.1处方 配方颗粒汤剂与饮片汤剂的制备�
3.1.1处方 姜厚朴15g，大黄12g，炒枳实9g。�
3.1.2配方颗粒汤剂的制备
称取与中药饮片相当量的三味配方颗粒,按组号分别混合后,各加入100℃左右的水40mL搅拌溶解,冷后定容至50mL,备用。�
3.1.3 饮片汤剂的制备
按处方比例称取中药饮片姜厚朴150g，大黄120g，炒枳实90g，按组号分别混合后，分别置煎药机内加水600mL，浸渍30min后，用武火急煎至沸，再用文火保持微沸1h，滤过，浓缩，冷却定容至500mL，备用。�
3.1.4 供试品溶液的制备
精密量取饮片汤剂5mL，加盐酸2滴，用三氯甲烷振摇提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得饮片汤剂供试品溶液。另精密量取配方颗粒汤剂5mL，同法制得配方颗粒汤剂供试品溶液。�
3.1.5阴性空白对照溶液的制备
按其处方，制备缺味（姜厚朴）中药的阴性空白样品对照液，照上述供试品溶液的制备方法制成配方颗粒汤剂及饮片汤剂的阴性空白对照溶液。�
3.1.6对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的厚朴酚对照品适量，甲醇溶解定容，制成每1mL含厚朴酚15μg的溶液。�
3.2系统适用性试验
取厚朴酚对照品溶液、阴性空白对照溶液、供试品溶液，按上述色谱条件下进样20μL，得HPLC图谱，结果见图1 。由图1C和E可知，在厚朴酚对照品出峰处没有干扰峰出现，故供试品中的其他组分对厚朴酚测定无干扰作用。理论塔板数按厚朴酚峰计算不应低于4000，分离度大于1.5，厚朴酚对称因子为0.95~1.05之间。�
3.3线性关系的考察
精密称取厚朴酚16.54mg，置50mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取5mL稀释至10mL，作为厚朴酚对照品储备液。分别精密吸取对照品溶液0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、5.0、8.0、10、15、20、25μL，注入高效液相色谱仪，按上述条件测定，记录峰面积，以峰面积(y)为纵坐标、进样浓度(x)为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y＝1.4855×106X＋2.3128×104，r=0.99998。结果表明厚朴酚在16.54～4135μg•mL-1之间呈良好的线性关系。�
3.4精密度试验
取同一批供试品溶液（①号组），进样20μL，重复进样5次，测得：厚朴酚峰面积的RSD为0.10%。再取厚朴酚对照品溶液，重复进样5次，测得：厚朴酚峰面积的RSD为0.07%。说明仪器的精密度良好。�
3.5重复性试验
取同一批供试品溶液5份（①号组），按3.1.4项下供试品溶液的制备方法制备供试品液,平行测定，厚朴酚的含量为0.1286mg•mL-1，RSD为1.49%（n=5）。说明方法重现性良好。�
3.6稳定性试验
取同一批供试品溶液（①号组，厚朴酚含量为0.1286mg•mL-1），在常温下放置12h，每间隔2h测定1次，连续共测定6次，厚朴酚峰面积RSD为0.56%。表明供试品溶液在12h内稳定性良好。�
3.7回收率试验
采用加样回收试验方法，精密量取已知厚朴酚含量（①号组，厚朴酚的含量为0.1286mg•mL-1）的供试品溶液6份，分别加入一定量对照品，照3.1.4项下操作，分别按上述色谱条件测定，计算结果见表1。�
3.8样品含量测定
精密量取各组供试品溶液，每组3份，每份5mL，按3.1.4项下方法制备供试品溶液。另精密称取厚朴酚对照品适量，同3.1.6项下制备对照品溶液，按上述色谱条件进样20μL，记录厚朴酚峰面积，按外标法计算含量。结果见表2。�
4讨 论�
4.1 提取方法的选择
笔者曾用滤纸和滤膜直接过滤供试品溶液，可杂质峰很多，难以达到有效分离；所以参考文献方法[4]提取，结果杂质峰减少许多，厚朴酚峰可达到与杂质峰有效分离，故选用此方法。氯仿提取次数：笔者分别试过1、2、3、4、5次提取，以第1次提取的供试品中厚朴酚峰面积最大，然后逐次迅速减少，到第4次厚朴酚峰面积已很小，故选用提取3次。�
4.2流动相的确定
笔者比较了甲醇－水（78∶22）[4]、甲醇－乙腈－水（50∶20∶80）[4]、甲醇－1%醋酸溶液(80∶20)[5]等3种流动相，结果以甲醇－1%醋酸溶液(80∶20)分离效果既好又快，故选用此为流动相。�
4.3 两种汤剂中厚朴酚含量差异分析
为尽可能客观、真实反应临床饮片实际应用情况，本实验所采用的试药分组为随机组合。从实际结果看，配方颗粒汤剂平均含量为0.1191mg•mL-1，RSD为19.58%；饮片汤剂平均含量为0.0753mg•mL-1，RSD为100.1%。配方颗粒汤剂中厚朴酚含量比饮片汤剂高，并且3组含量比较接近，汤剂质量容易控制；而饮片汤剂3组含量相互差别很大，汤剂质量难以控制。这主要与配方颗粒是采用现代工艺将单味中药经提取、浓缩、干燥精制而成，在原料使用、制备提取、质量控制等环节进行优化选择有关，而饮片汤剂制备是个体生产，在这些环节不可能都进行优化选择，同时因厚朴酚具有一定的挥发性，本实验所采用的部分批次的姜厚朴生产时间较早，也可能致其含量降低。另外，在本实验中饮片汤剂是用煎药机和同一人操作提取的，而在实际当中，由于个人之间的差异，对煎药火候、加水多少、时间长短及饮片质量差异等环节影响很大，会导致汤剂的质量差异更大，质量更不易控制。说明由配方颗粒制备的汤剂相对比较稳定，相对容易控制质量，也提示了在临床使用时,配方颗粒汤剂较饮片汤剂更有优越性。�
参考文献�
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