接骨宝对实验性骨折愈合过程中ＢＭＰ－２表达的影响 骨折吃接骨药能尽快愈合吗?
时间：2019-01-11 04:22:58 来源：达达文档网 本文已影响 人 
[摘要] 目的：通过观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在骨折愈合过程中的表达及分布情况，探讨接骨宝对实验性骨折愈合过程中BMP-2表达的影响和促进骨折愈合的机制。方法：制作40只兔桡骨骨折模型，随机分为接骨宝组及对照组，术后1 d接骨宝组即喂服接骨宝，对照组喂服白开水。分别于术后1、2、3、4、5周取样，随后进行组织学切片及BMP-2免疫组化染色，并采用图像分析系统对BMP-2的表达进行分析。结果：①在骨折愈合过程中，两组在骨痂处的BMP-2含量的总体变化趋势相同,均为早期高后期低，用药组的BMP-2高峰值出现在第2周，对照组出现在第3周；②接骨宝组在整个愈合过程中BMP-2的含量均高于同期的对照组。结论：接骨宝能影响骨折愈合过程中BMP-2的合成、分泌、分布和衰减，进而调节成骨细胞、软骨细胞的分化，促进骨细胞的成熟，增强破骨细胞的活性，加速骨折的修复和塑形，缩短了骨折愈合的进程。
[关键词] 接骨宝；骨折愈合；骨形态发生蛋白-2；生长因子
[中图分类号] R683[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）12（b）-016-03
Influence of Jiegubao on the expression of BMP-2 during the process of experimental fracture healing
LIANG Wen, CHEN Li-chun, CHEN Can-er, HUANG Shi-zhang
(The Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou510260, China)
[Abstract] Objective: To investigate the influence of Jiegubao on the expression of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and mechanism of fracture healing promoted by Jiegubao by observing the expression and distribution of BMP-2 during fracture healing. Methods: The 40 model rabbits of fracture of radius were prepared and randomly divided into Jiegubao group and control group. The model rabbits of Jiegubao group were treated with decoction of Jiegubao by intragastric administration, and the rabbits of control group were treated with plain boiled water. The samples of all the model rabbits were collected respectively 1, 2, 3, 4 and 5 weeks after the operation of fracture of radius respectively. The samples of radius were observed by the method of histology, and BMP-2 was detected by immunohistochemistry. Expression of BMP-2 was analyzed by image analysis system. Results: ①There were identical total change tendency of BMP-2 contents of two group osteotylus during fracture healing. BMP-2 contents of osteotylus were plentiful in earlier period, and were low in later period. High-peak of BMP-2 contents of Jiegubao group occurred in the second week, and that of control group occurred in the third week. ②BMP-2 contents of Jiegubao group were surpassed to that of control group during the whole process of fracture healing. Conclusion: Jiegubao can adjust composition, secretion, distribution and decrescence of BMP-2 during fracture healing, regulate cell differentiation of osteoblast and chondrocyte, promote the mature of bone cell, strengthen the activity of osteoclast, accelerate renovation and moulding of fracture and shorten the proceeding of fracture healing.
[Key words] Jiegubao; Fracture healing; Bone morphogenetic protein-2; Growth factor
增强骨折的愈合质量、缩短骨折修复的时间以及减少骨折的并发症等，是中医骨伤科治疗骨折的强项和优势，研究中医治疗骨折的内在机制，尤其是从分子生物学角度探讨药物对骨折愈合的影响机制是近年来的研究热点。接骨宝口服液是我院治疗骨折的临床制剂，着重于补肾续骨，具有促进骨折愈合及治疗骨折迟缓愈合等作用，临床疗效确切，并已从组织学、组织形态学等不同角度对其促进骨折愈合的机制进行了探讨[1]。笔者以骨形态发生蛋白-2(BMP-2)作为观察指标，对接骨宝在骨折愈合过程中对BMP-2表达的影响进行了研究，拟从分子生物学水平对其作用机制作深入的探讨，现将结果报道如下：
1 材料与方法
1.1 材料
健康新西兰长耳大白兔40只，10月龄，体重(2.0±0.3) kg，雌雄各半，由广东省实验动物中心统一提供；接骨宝口服液由本院中药制剂室提供；实验用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)山羊抗人单克隆抗体及SABC免疫组化试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司产品。
1.2 方法
1.2.1 动物分组及模型制备40只兔随机分为接骨宝组及对照组，分组后使用手术钳夹断右前肢桡尺骨中段，以出现假性关节为准。术后根据小夹板固定治疗骨折原理，采用同一方法用硬纸皮及胶布做前臂外固定。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 1.2.2 给药方法接骨宝组造模后第2天开始按2.5 ｍｌ/(ｋｇ・d)标准喂服给药；对照组只喂以白开水，不服用任何药物。实验动物均在同一实验室条件下用同样方法以普通饲料由专门技术人员饲养和管理。
1.3 标本取材
术后1、2、3、4、5周，从接骨宝组和对照组分别随机抽取4只兔子，处死后取样。取样时均截取右侧桡骨，包括原骨折断端及远近端各长约1.5 cm的正常骨质，并剔除其上的软组织。
1.4 组织学标本制备
标本经4%多聚甲醛溶液固定、EDTA脱钙、石蜡包埋、切片。每组隔3张抽出1张进行苏木精-伊红(HE)染色，即切片经脱蜡脱水、HE染色后进行组织学观察；余下切片进行免疫组化BMP-2染色。
1.5 免疫组化检测
参照BMP-2免疫组织化学试剂盒的操作方法进行免疫组化染色。用0.01 mmol/L磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照，染色结果为阴性，细胞染色中出现黄褐色为阳性反应，每次染色均作对照。染色切片经显微镜放大400倍，每例随机摄取骨痂组织图像5幅。每批和批间输入的图像入射光强度皆严格控制在同一水平。通过与计算机相连的显微镜，将采集到的免疫组化切片图像存入微机，用病理图像分析系统进行分析。通过彩色分割方法，分割骨痂图像中BMP-2阳性产物区域，求出阳性产物平均光密度值(代表BMP-2平均着色程度)和阳性产物平均积分光密度(代表BMP-2的含量)。
1.6 统计学方法
数据以均数±标准差(x±s)表示，以SPSS 12.0统计软件进行统计学处理。组间比较采用t检验， P 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文
