现代实验技术在中药胚胎毒性中的应用
时间：2021-04-23 08:00:22 来源：达达文档网 本文已影响 人 
【摘 要】本次研究分别阐述了目前中药药理学常用的几种现代实验技术，体外细胞培养、微核实验、血清药理学实验，对补充论述目前涌现的两种发展前景较大的新实验技术，基因芯片技术、胚胎干细胞技术进行，最后做出展望。
【关键词】现代实验技术；中药；胚胎毒性
胚胎毒性指外来化合物在无明显母体毒性使用剂量下，通过胎盘屏障对胎儿产生损害，影响后者正常发育，中医将具有胚胎毒性的药物称为“妊娠禁忌药”，是中医重要的理论之一[1]。古代中医通过长时间的经验积累、症状观察总结出了一整套有关“妊娠禁忌药”体系，但随着现代中医药学发展，中药制剂广泛应用于临床，不良反应及毒性事件例数显著增加，以往的经验、理论已不能满足现阶段临床需要。为保障母婴健康，预防、治疗胎毒，通过现代实验技术对中药胚胎毒性内容进行完善显得非常必要。
1 体外细胞培养
细胞培养技术是最常用的现代实验技术，通过获取组织细胞应用特殊的器材于体外条件下培养或生长，培养过程中细胞并不再形成组织；培养物可为单个细胞也可为细胞群[2]。细胞培养技术也是中药毒性实验最常用的方法，应用于胚胎毒性研究，可通过获取胎儿或胎盘组织细胞，经体位细胞培养后，将提取出的药物与细胞混合，直接观察具有活性细胞的生命活动，同时可应用相差、荧光、电镜、同位素标记等方法观察细胞状况，对药剂的药性做出初步的判断。细胞培养技术具有方便、快捷、耗材少、可直接观察等优点，但同时因体外细胞状态可能与体内差异较大，其培养结果并不能直接代表体内结果。
2 微核实验
细胞回复突变实验是目前常用的检测遗传毒性的实验方法之一，通过动物实验，在被检动物接受被检化合物后，对细胞微核变化情况进行观察，细胞微核因其为细胞受遗传毒性作用的遗传学终点，其突变具有极高的研究价值[2]。王小红等，以黄苓水煎服，按照不同剂量灌服雌性小白鼠，待其受孕14日后处死，并取母鼠胸骨与胎鼠分别行骨髓微核、胎肝血微核实验，结果表明服用不同剂量服用者与未服用者间数据差异不显著（P<0.05），可初步判定黄苓应用于孕产妇未见显著致突变作用，较为安全可靠。刘冰等对五加皮、黄苓、猪苓、山慈菇四类抗肿瘤中药进行实验，通过进行活体小白鼠髓嗜多染红细胞微核实验，显示五加皮、山慈菇等药物各剂量间，不同药物间致髓核突变差异不显著（P>0.05）。
3 血清药理研究
血清药理学实验方法通过给动物服药，后取其血清作为药物源，进行药理学观察。整个过程中，被研究药物其粗大颗粒物质、分子组成复杂的成分通过消化吸收、代谢等体内过程，取含药血清进行药理实验，较接近药物于体内环境产生药理作用，针对中药特别是重要复方，实验效果较显著，能有效排除中药成分中非药理成分，杂质等，规避了中药需处理、服用、消化等过程，较体外培养更佳客观、确切，理论上较科学、真实，其研究结果相对细胞培养来说更加可靠[3]。
目前常用的实验动物为小白鼠，后者经过长时间的培养杂交，已能够控制培养所需品种，以满足特殊实验需要。应用于中药胎毒研究，使用大量怀孕纯系小白鼠进行药理实验，观察小白鼠胎儿发育情况，或进行药动力学实验，甚至进行尸检，能得出相对可靠的结论。如肖凯等使用乌头类中药进行小白鼠胚胎发育毒性实验，选用盐附子、生川乌、生草乌等中药，按不同用药剂量进行实验，结果显示使用剂量较大对象出现轻微母体毒性，表现为体重增加缓慢、摄食量减少，其中生草乌可致胎鼠发育迟缓，甚至是胸骨数减少。
血清药理学实验是中医胎毒研究最常用的方法，可获得大量有价值的结论，但该法也有一定的缺陷，如血清中药浓度并非随给药剂量增加而增加，采血时间及血清是否活灭标准争议较大。
4 其它实验方法
基因芯片技术，利用DNA分子可变性、杂交的特性，结合计算机科学、物理、数学、聚合酶链式反应等技术，将核酸技术持续化、微型化，为DNA准确测序、转录、基因诊断、突变性判断提供了条件[4]。该技术因起步相对较晚，且综合性较强，尚处于发展阶段，但因其精准、确切、可操作等特性，拥有广阔的前景，对中药胚胎毒性药理学研究具有巨大的推动作用。
胚胎干细胞实验，胚胎干细胞是生物体内特殊的多功能干细胞，具有较强的可塑性，能够分化成为各类生物组织、器官，弥补了体外细胞培养细胞不能分化、与生物体内差异较大等缺点，为体外发育细胞培养实验提供了条件。
5 总结
中药是我国传统文化的精华之一，在很长的一段历史内，在我国医疗事业中起到支柱性作用，但步入现代后，因其缺乏足够的实验结果、理论支持，中药面临信任危机。中药特别是复方成分复杂，应用传统实验方法行“胚胎毒性”药理研究较为困难，但随着现代实验技术的不断发展进步，高效、准确的进行中药“胚胎毒性”研究成为可能。
参考文献
[1]宋美琴，牛丽.中药有效成分体外抗病毒活性研究进展[J].国外畜牧学：猪与禽，2011，31（03）：102-103.
[2]杨明杰，曹佳，余争平.微核实验的分子生物学研究进展[J].癌变畸变突变，2010，22（4）：130-132.
[3]阴赪宏，李兰芳，姜廷良.中药含药血清药理研究现状[J].中国中医药信息杂志，2011，34（10）：283-284.
[4]滕晓坤，肖华胜.基因芯片与高通量DNA测序技术前景分析[J].中国科学（C辑：生命科学），2010，42（11）：320-321.
