夹带剂对超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA的影响|丹参酮和丹参的区别
时间：2019-01-10 04:30:46 来源：达达文档网 本文已影响 人 
[摘要] 目的：对夹带剂对超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA的影响进行研究。方法：从夹带剂总量和单次加入夹带剂量两个方面分析，设计以丹参酮ⅡA含量为指标的单因素实验。结果：在萃取压力35 MPa、萃取温度65℃、解析压力6 MPa、解析温度45℃的条件下，提取时间3 h，95%乙醇作为夹带剂，夹带剂用量是：药材量的200%（质量分数）；单次加入夹带剂量是：每隔0.5 h加入一次，分别是药材量的0.5倍，0.4倍，0.4倍，0.4倍，0.2倍和0.1倍。丹参酮ⅡA提取率均在90%以上，药渣中丹参酮ⅡA残留率均在6%左右。结论：夹带剂加入总量和单次加入量均对萃取结果有显著影响。
[关键词] 丹参；超临界CO2；夹带剂；丹参酮ⅡA
[中图分类号] R284.2[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2011）04（b）-028-03
Effects of entrainer in extracting of tanshinone ⅡA from the root of Salvia miltiorrhiza Bge. by supercritical carbon dioxide fluid
SUN Hongmei，WANG Tao，GE Fahuan，LI Jinhua，XU Wencong
Guangzhou Hanfang Pharmaceutical Company Limited/National Engineer Research Center for Modernization of Extraction and Separation of Traditional Chinese Medicine (TCM),Guangzhou 510240
[Abstract] Objective: To study the effects of entrainer in extracting of tanshinone Ⅱ A from the root of Salvia miltiorrhiza Bge. by supercritical carbon dioxide fluid. Methods: The total dosage of entrainer and a single dose were analyzed and a single-factor experiment was designed with the content of tanshinone ⅡA as the index. Results: When the extraction was 35 MPa，extraction temperatrue was 65℃, separate pressure was 6 MPa, and separate temperature was 45℃, extraction time was 3 h and entrainer was ethanol（95％）, the total dosage of entrainer was 200%;the single dose of entrainer was Chinese raw material for medicine 0.5 times, 0.4 times, 0.4 times, 0.4 times, 0.2 times and 0.1 time. Tanshinone ⅡA extraction rate was above 90%, in dregs of medical decoction remain rate was about 6%. Conclusion:The total dosage and the single dosage of the added entrainer have the remarkable influence to the extract result.
[Key words] Salvia mihiorrhiza; Supereritical carbon dioxid; Entrainer; Tanshinone ⅡA
丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge．的干燥根及根茎。丹参酮ⅡA是中药丹参的主要有效成分，具有保护心肌缺血缺氧、抑制血小板聚集的功能，还具有明显的抗肿瘤作用[1-2]。近年来，超临界CO2萃取被应用于丹参中丹参酮ⅡA的萃取[3-4]，总结分析，夹带剂均采用无水乙醇和95%乙醇，但是其用量却因各工艺不同有较大差别，质量分数从30%到200%不等[5-8]。因此，本文重点考察夹带剂的使用方法对萃取结果的影响，进而对超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA工艺进行研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器
A221-50-06型超临界CO2萃取装置(南通华安超临界萃取有限公司)；日本岛津公司高效液相色谱仪：LC-10AT泵、SPD-M10AVP二极管阵列检测器，Class-M10A工作站。
1.2 试药
丹参药材（广州汉方现代中药研究开发有限公司提供）；甲醇(色谱纯，美国sigma公司提供)；水(millipo超纯水)；CO2瓶装气(食品级，纯度>99%)；丹参酮ⅡA对照品(中国药品生物制品检定所提供)。
2 实验方法
2.1 超临界CO2萃取丹参酮ⅡA方法
称取500 g丹参药材粗粉加入HA221-50-06型5 L萃取釜中，启动超临界CO2萃取装置，预热萃取釜、解析釜，当温度到达工艺要求后开启CO2升压，压力达到工艺要求后，调节CO2流量，开始进行循环萃取，考虑工业生产工艺和成本，夹带剂选用95%乙醇（通过计量泵加入萃取釜），且用量控制在药材量的2倍以内，并保持恒压。萃取一定时间后出料，萃取物室温析晶2 h后抽滤，晶体减压干燥；滤液浓缩，进行质量分析。
在预实验的基础上，固定萃取压力35 MPa、萃取温度65℃；解析压力6 MPa，解析温度45℃，CO2流量200 ml/min，萃取时间3 h，本试验主要对夹带剂总量和夹带剂单次加入量进行单因素实验。具体工艺参数见表1。
2.2 高效液相法测定丹参酮ⅡA的含量
2.2.1 对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含丹参酮ⅡA 60 μg的溶液，即得。
2.2.2 药材样品溶液制备取药材粉末(过三号筛)约0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，称定重量，加热回流l h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 供试品溶液制备取本品约5 mg，精密称定，置10 ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 实验所需提取率计算公式
丹参酮ⅡA的提取率（TY）为萃取出的丹参酮ⅡA相对所萃取的丹参药材的质量分数，计算公式为：TY=(m1×n)/m2。
式中，m1为萃取得到的丹参粗产物的质量（g），n为粗产物中相应丹参酮ⅡA的质量分数（%），m2为所萃取的丹参药材的质量（g）。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 3.1 夹带剂总量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响
研究夹带剂总量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响时，固定夹带剂平均分6次加入。丹参药材经超临界CO2萃取得到的丹参酮ⅡA主要分为两部分，一部分是直接结晶出来的提取物；另外一部分是剩余过滤液经浓缩所得的提取物。本试验对以上两部分的丹参酮ⅡA，萃取后药材残渣中丹参酮ⅡA和丹参药材中丹参酮ⅡA含量均进行了测定。测定结果见表2。
表2 夹带剂总量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响试验结果
注：试验1，试验2，试验3和试验4按表1四个水平顺序试验
由表2可知，不加入夹带剂时，丹参酮ⅡA提取率极低，这说明超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA使用夹带剂是必要的；而当夹带剂总量是药材量的200%时，丹参酮ⅡA萃取较完全，故从夹带剂总量考虑可选用药材量的200%的工艺条件进行丹参药材中丹参酮ⅡA的萃取。
3.2 夹带剂单次加入量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响
研究夹带剂单次加入量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响时，固定夹带剂总量为药材量的200%。本试验也对晶体和过滤液两部分的丹参酮ⅡA，萃取后药材残渣中丹参酮ⅡA和丹参药材中丹参酮ⅡA含量均进行了测定。测定结果见表3。
表3 夹带剂单次加入量对超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的影响试验结果
注：试验1，试验2，试验3按表1中2~4三个水平顺序试验
由表3可知，夹带剂单次加入量调整对丹参酮ⅡA提取率和药渣中丹参酮ⅡA残留率都有明显影响。从丹参酮ⅡA提取率高和药渣中丹参酮ⅡA残留率低的最佳工艺考虑，夹带剂单次加入量的最佳工艺条件是：每隔0.5 h加入一次，分别是药材量的0.5倍，0.4倍，0.4倍，0.4倍,0.2倍和0.1倍。
3.3 验证实验
按照上述实验最佳工艺参数平行进行三次验证实验，工艺条件选择萃取压力35 MPa、萃取温度65℃；解析压力6 MPa，解析温度45℃，CO2流量200 ml/min，萃取时间3 h，95%乙醇作为夹带剂，夹带剂加入总量为药材量的200%，每隔0.5 h加入一次，分别是药材量的0.5倍，0.4倍，0.4倍，0.4倍，0.2倍和0.1倍。结果发现丹参酮ⅡA提取率均在90%以上，药渣中丹参酮ⅡA残留率均在6%左右。证明夹带剂使用对超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA影响显著。
4 讨论
在本试验中，不加入夹带剂萃取时，丹参酮ⅡA提取率极低，说明超临界CO2萃取丹参中丹参酮ⅡA试验中必须加入夹带剂，夹带剂的总量是最主要的影响因素。
本试验总结分析了前人研究成果，在此基础上对工艺进行了优化，得出夹带剂的最佳工艺参数是：加入药材量200%的夹带剂；每隔0.5 h加入一次，分别是药材量的0.5倍，0.4倍，0.4倍，0.4倍，0.2倍和0.1倍。此时，晶体和过滤液两部分总丹参酮ⅡA提取率在90%以上，而药渣中丹参酮ⅡA残留率控制在6%左右。
丹参萃取物析晶后滤液浓缩物比较黏稠，主要原因为经析晶后大部分脂溶物残留在滤液中，造成干燥较困难。但是由于这部分过滤液中也含有丹参酮ⅡA，为避免浪费，可以在其中加入抗黏剂进行干燥和粉碎。
[参考文献]
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（收稿日期：2011-01-28）
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