[前列腺增生组织中EGF\TGF-β1表达和细胞凋亡及其意义研究] 前列腺增生的最佳治疗

　　【摘要】目的 研究前列腺增生组织中EGF、TGF-β1表达和细胞凋亡及其临床意义。方法 应用免疫组化S-P法及原位凋亡Tunel试剂盒检测前列腺增生组织87例，前列腺正常组织20例的EGF、TGF-β1表达和细胞凋亡。结果 （1）87例前列腺增生组织中EGF、TGF-β表达和细胞凋亡的阳性检出率分别为63.2%（55/87）、47.1%（41/87）。而在前列腺正常组织中EGF、TGF-β1和细胞凋亡的阳性检出率分别为10.0%（2/20）、5.0%（1/20）。（2）临床症状与EGF、TGF-β1S表达之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 提示EGF、TGF-β1表达和细胞凋亡在前列腺增生的发生发展中其重要作用。
　　【关键词】前列腺增生 表皮生长因子 转化生长因子-β1 原位凋亡
　　中图分类号：R697.3 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）5-050-03
　　Study on the expression of EGF, TGF-β1 and the apoptosis in Prostatic Hyperplasia
　　YANG Yaowei1 ZHANG Li2 LI Xiaomei3 PU Hongwei3*
　　(1. Xinjiang Jiayin Hospital,Urumqi , 830011, China;2. Basic medical college, Xinjiang Medical University, Urumqi , 830011, China;
　　3. Vocational and Technical College，Xinjiang Medical University; Urumqi ,830011, China )
　　【Abstract】Objective To investigate the expression of EGF, TGF-β1 and the apoptosis in prostatic hyperplasia and the relationship between clinical sing and their expression. Method 87 cases tissues with prostatic hyperplasia, 20 cases of prostatic normal tissue were examined for EGF, TGF-β1 by immunohistochemisry and apoptosis by in-situ TUNEL. Result (1)The positive frequency of expression of EGF, TGF-β1 and the apoptosis in 87 cases of tissues with prostatic hyperplasia was 63.2%(55/87) and 47.1%(41/87). And the expression of those in normal tissues were 10.0%(2/20), 5.0%(1/20). (2)There is no difference between clinical sings and the expression (P>0.05). Conclusion It is suggested that EGF, TGF-β1 and the apoptosis play a role in the pathogen and development of prostatic plasia.
　　【Key words】prostatic plasia epithelial growth factor (EGF) transtransforming growth factor-β1 (TGF-β1) n-situ apoptosis
　　
　　BPH是老年男性常见的疾病, 睾丸功能和老龄是其主要的发病因素, 其具体发病机制十分复杂。人们在对前列腺活检、外科手术后和尸检标本的研究中发现BPH 常伴有炎症细胞浸润[1]。1979 年Kohnen等[2]报道在161例因BPH 行前列腺切除术患者的术后标本中, 炎症的发生率为98. 1%。增生前列腺标本中普遍伴发慢性炎症的现象引发了人们对慢性前列腺炎与BPH 之间相关性的关注。同时研究发现炎症与许多慢性增生性疾病有关, 其原因在于炎症反应往往伴随着多种多肽生长因子的释放, 如血小板衍化生长因子(PDGF )、成纤维细胞生长因子(FGF )、转化生长因子(TGF)等, 而这些生长因子能诱导细胞的分裂, 促进组织的增生[3],本组研究选择了EGF、TGF-β1凋亡等几个因素，研究在前列腺增生组织中的表达，以及与临床症状、临床化验指标的关系，以探讨BPH的发病机制，为临床治疗奠定理论基础。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　1.1 标本 收集新疆佳音医院汽化电切手术病例经病理确诊的前列腺增生组织87例，前列腺正常组织20例，年龄34～65岁。白细胞、卵磷脂计数，搜集临床症状。所有标本均经10%福尔马林固定后常规石蜡包埋。以上病例均经病理检查，诊断明确无误。
　　1.2切片处理 研究用蜡块以4～5μm厚度连续切片5张，贴片后置55℃烤箱中3小时后取出备用。
　　1.3 试剂 用抗体EGF（ RAB-0576）、TGF-β1 （RAB-0144）均为兔抗人多克隆抗体（福州迈新生物技术公司）。原位凋亡Tunel试剂盒（德国宝来曼-罗氏公司产品）。
　　2 方法
　　2.1 免疫组化染色方法，采用S-P法按试剂盒说明进行
　　2.2 原位凋亡检测，按试剂盒说明进行。
　　2.3 对照设置 免疫组化阳性对照采用已知含有靶抗原的组织切片与待测切片同步进行免疫染色。阴性对照根据本实验的情况采用空白对照，即以PBS代替一抗进行免疫染色并完成全过程。原位凋亡检测所设对照按照试剂说明书推荐，采用Tunel试剂盒内的标记溶液代替Tunel反应液作为阴性对照。
　　2.4 结果判定EGF、TGF-β1阳性结果为细胞胞浆内出现棕黄色颗粒，原位凋亡的阳性细胞为细胞核内出现棕黄色颗粒
　　2.5 结果统计 用SSPS16.0软件进行X2检验。
　　3 结果
　　3.1 组织中EGF、TGF-β1的表达
　　87例前列腺增生组织中EGF、TGF-β1表达的阳性检出率分别为63.2%（55/87）、47.1%（41/87）。而在前列腺正常组织中EGF、TGF-β1表达的阳性检出率分别为10.0%（2/20）、5.0%（1/20）。
　　3.2 增生组织中EGF、TGF-β1的表达与临床指标的结果
　　2.1EGF、TGF-β1与前列腺液中白细胞计数的关系（见表1）
　　表1 EGF、TGF-β1与前列腺液中白细胞计数的关系
　　白细胞（个）＜10、11-25、≥25的EGF阳性检出率分别为70.0%、60.9%、73.5%，但三者比较差异无统计学意义，P＞0.05。白细胞（个）＜10、11-25、≥25的TGF-β1阳性检出率分别为26.7%、73.9%、64.7%。但三者比较差异无统计学意义，P＞0.05。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　2.2 EGF、TGF-β1的表达与前列腺液中卵磷脂计数的关系（见表2）
　　表2 EGF、TGF-β1的表达与前列腺液中卵磷脂计数的关系
　　卵磷脂＜25%、25-49%、≥50%的EGF阳性检出率分别为72.0%、72.7%、72.4%，三者差异无统计学意义，P＞0.05。卵磷脂＜25%、25-49%、≥50%的TGF-β1阳性检出率分别为（56.0%、57.6%、48.3%，三者差异无统计学意义，P＞0.05。
　　2.3EGF、TGF-β1的表达与尿频的关系（见表3）
　　表3EGF、TGF-β1的表达与尿频的关系
　　尿频和无尿频患者EGF的阳性检出率分别为70.7%、67.4%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。尿频和无尿频患者TGF-β1的阳性检出率分别为48.8%、58.7%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。
　　2.4 EGF、TGF-β1的表达与尿痛的关系（见表4）
　　尿痛、无尿痛的EGF的阳性检出率分别为66.7%、70.8%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。尿痛、无尿痛的TGF-β1的阳性检出率分别为53.9%、54.2%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。
　　表4 EGF、TGF-β1的表达与尿痛的关系
　　2.5 EGF、TGF-β1的表达与尿急的关系（见表5）
　　表5 EGF、TGF-β1的表达与尿急的关系
　　尿急、无尿急的EGF的阳性检出率分别为75.8%、64.8%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。尿急、无尿急的TGF-β1的阳性检出率分别为54.6%、53.7%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。
　　2.6 EGF、TGF-β1的表达与夜尿的关系（见表6）
　　表6 EGF、TGF-β1的表达与夜尿的关系（见表6）
　　夜尿、无夜尿的EGF的阳性检出率分别为82.2%、71.9%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。夜尿、无夜尿的TGF-β1的阳性检出率分别为60.0%、62.5%，二者差异无统计学意义，P＞0.05。
　　3 组织中细胞凋亡的检出率
　　87例前列腺增生组织中细胞凋亡的阳性检出率为72.4%（63/87）。20例正常前列腺组织的细胞凋亡的阳性检出率为15.0%（3/20）
　　4 讨论
　　正常情况下，EGF和TGF-β1对前列腺上皮细胞的作用效果是相反的，EGF促使其增生，而TGF-β1对增生起抑制作用，两种因子的相互作用维持前列腺组织的正常形态。值得提出的是，研究发现TGF-β1在移行区也有高表达，该因子属细胞增殖抑制因子，其高表达应该抑制细胞增殖，以防止BPH的发生，但结果并不如此。这种矛盾结果的解释是：①BPH组织对TGF-β1的反应与正常前列腺组织不同，或细胞上的受体有差别，TGF-β1与其结合后，不但不能抑制增生，反而起到刺激增生的作用；②EGF和bFGF的联合作用大于TGF-β1的作用，尽管TGF-β1有高表达，但也不能抑制EGF和bFGF的促增生作用；③bFGF和TGF-β1在前列腺组织中有1个相对恒定的比例，这个比例一旦被破坏，就可引起增生。总之，这些生长因子在BPH的发生中是一个重要的因素，但哪个或哪些因素是起动因子、它们之间及其与其它因子之间的相互关系还有待进一步研究[4]。
　　本组研究显示87例前列腺增生组织中EGF阳性检出率分别为63.2%但与前列腺液中的白细胞数、卵磷脂计数及尿频、尿痛、尿急、夜尿无关，提示EGF在BPH发生中具有重要作用，同前列腺增生所引起的临床症状有关，但不密切。
　　有研究显示，TGF-βR1在BPH上皮组织中的强阳性染色率（61.3%）显著高于正常前列腺组织（4.5%）（P＜0.01）。说明TGF-βR1在BPH组织中的含量亦增加，多数细胞中TGF-β均有低量表达，所有对TGF-β有反应的细胞都可以检测到受体[5]。TGF-βR1抑制上皮细胞增殖以及可能激活前列腺上皮细胞凋亡，TGF-βR的mRNA在正常鼠前列腺组织中表达很低，在雄激素非依赖性前列腺癌细胞中有较高表达。因此，TGF-βR1在BPH上皮组织中的过度表达影响了TGF-βR2与TGF-β的结合，从而降低TGF-β的生物活性，间接降低了TGF-β对前列腺上皮细胞的抑制作用，提示TGF-βR1可能参与BPH组织的病理变化过程。TGF-βR1在BPH上皮组织中的强阳性染色率（61.3%）显著高于正常前列腺组织（4.5%）（P＜0.01）。说明TGF-βR1在BPH组织中的含量亦增加，多数细胞中TGF-β均有低量表达，所有对TGF-β有反应的细胞都可以检测到受体[5]。TGF-βR1抑制上皮细胞增殖以及可能激活前列腺上皮细胞凋亡，TGF-βR的mRNA在正常鼠前列腺组织中表达很低，在雄激素非依赖性前列腺癌细胞中有较高表达。因此，TGF-βR1在BPH上皮组织中的过度表达影响了TGF-βR2与TGF-β的结合，从而降低TGF-β的生物活性，间接降低了TGF-β对前列腺上皮细胞的抑制作用，提示TGF-βR1可能参与BPH组织的病理变化过程[6]。
　　本组研究显示87例前列腺增生组织中TGF-β1阳性检出率分别为54.0%，与前列腺液中的白细胞数、卵磷脂计数及尿频、尿痛、尿急、夜尿无关，提示TGF-β1在BPH发生中具有重要作用，同前列腺增生的临床症状有关，但不密切。
　　研究发现bcl 2蛋白在BPH组织中表达较正常组织明显升高[7]。有学者应用转基因技术培育出bcl 2基因前列腺组织特异性转基因小鼠，该鼠前列腺组织过量表达bcl 2蛋白，同时伴有明显的BPH病理学改变，证实了bcl 2基因在BPH发病中起重要作用[8]。文献报道在BPH组织中发现有p53基因突变现象，提示BPH发病可能与p53基因有一定关系[9]。因此，为进一步了解BPH发病中细胞凋亡的作用机制，有必要对凋亡相关基因在BPH发病中的作用进行更深入地研究。本组研究87例前列腺增生组织中细胞凋亡的阳性检出率分别为72.4%（63/87）。证实细胞凋亡的发生发展与前列腺增生有关。
　　参考文献
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　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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