超声联合AKR1B10在甲状腺结节良恶性鉴别中的应用
时间：2020-08-20 11:44:56 来源：达达文档网 本文已影响 人 
彭旭红 李佳 张健
【摘 要】：目的：探讨超声联合AKR1B10在甲状腺良恶性结节鉴别中的作用。方法：利用超声诊断甲状腺结节的良恶性特征;用免疫组织化学检测36例甲状腺病理组织中AKR1B10的表达水平（表达评分）;分析36例甲状腺结节患者的超声检查与AKR1B10表达评分联合诊断甲状腺结节性质，以病理诊断结果为金标准，评价超声检查、AKR1B10检测及联合诊断甲状腺结节良恶性的应用价值。结果：单用超声诊断甲状腺癌的准确率分别是75%（27/36）;单用肿瘤标志物AKR1B10诊断甲状腺肿瘤的准确率为75%（27/36）;超声联合肿瘤标志物AKR1B10检查诊断甲状腺腫瘤的准确率为97.20%（35/36），显著高于单独超声或单独AKR1B10检测。结论：超声联合肿瘤标志物AKR1B10检查可提高甲状腺肿瘤诊断的准确度、特异性，AKR1B10有望作为分子标志物，为甲状腺乳头状癌的临床诊断和治疗提新思路。
【关键词】：甲状腺肿瘤;超声;AKR1B10
【中图分类号】R876【文献标识码】B【文章编号】1672-3783（2019）10-03--01
当代社会由于环境问题和生活压力越来越大，甲状腺结节发生率越来越高。甲状腺结节是指在甲状腺内的肿块，包括增生性结节性甲状腺肿、甲状腺良性肿瘤、甲状腺囊肿、甲状腺癌等。甲状腺癌发病率呈逐渐上升趋势，甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma， PTC）是最常见的病理类型。甲状腺良恶性鉴别是甲状腺结节治疗的关键，诊断的金标准是病理组织诊断。病理活检之前判断甲状腺良恶性对发现结节后的下一步诊疗非常重要。超声医学诊断在甲状腺良恶性鉴别中具有重要的作用。另外，肿瘤标志物在实体肿瘤诊断方面具有重要的临床意义，目前没有甲状腺癌肿瘤标志物应用到临床，因此甲状腺乳头状癌特异性肿瘤标志物的确立，以及可靠、可行的检测手段的建立，对临床提高确诊率，改善甲状腺癌的治疗具有重要意义。
醛酮还原酶1B10（aldo-Keto reductase family 1 B10， AKR1B10）是醛酮还原酶超家族成员，在胃肠道正常上皮细胞内高表达，在胃肠道肿瘤组织中低表达;在多种非胃肠道实体肿瘤如乳腺癌、肝细胞癌、吸烟导致的非小细胞肺癌等肿瘤组织中高表达。我们前期研究发现AKR1B10是在甲状腺癌组织中高表达，与淋巴结转移正相关。AKR1B10是经溶酶体非经典途径分泌的分泌性蛋白，是潜在的肿瘤血清标记物及防治靶标。AKR1B10在甲状腺结节良恶性鉴别以及能否作为甲状腺癌血清标志物未有文献报道。因此，本研究探讨AKR1B10在甲状腺结节良恶性鉴别中的意义，并分析其联合超声鉴别甲状腺结节良恶性的应用价值，为临床诊断提供参考依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2013年1月至2015年7月到郴州市第一人民医院就诊的36例甲状腺结节患者的病理组织样本，其中良性甲状腺结节（结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡性腺瘤）15例，甲状腺乳头状癌21例。纳入标准：（1）患者未接受针对甲状腺的治疗;（2）有病理诊断结果;（3）有超声诊断结果。
1.2 AKR1B10免疫组化方法及结果评判
将用福尔马林浸泡的甲状腺组织包埋在蜡块中，用切片机切成组织薄片，经烤干、脱蜡、脱水后;用3%H2O2灭活组织中内源性过氧化物酶，用pH为6.0的枸橼酸缓冲液修复抗原抗原;用BSA封闭30 min。用兔抗AKR1B10抗体（实验室自己制备）孵育过夜，用1：1000的羊抗兔二抗37 ℃孵育1小时;然后用DAB显色，用苏木素复染，最后封片，显微镜观察AKR1B10的染色情况。
每张切片于高倍镜（40×）下选取5个相应病理组织视野，每个视野采用染色强度（无色为0分，淡黄色1分，深黄色2分，黄褐色3分）和染色面积（0-5%为0分，5-10%为1分，10-50%为2分，50%以上为3分）双重指标综合判断阳性表达情况，两项指标评分相乘，结果<2为计为“-”，2～3计为“+”，4～5计为“++”，6分以上计为“+++”。为降低人为误差，由两人分别在镜下评分，结果取二人打分的平均值，对评分差异较大的结果，请示病理科专家会诊。
1.3 超声诊断方法
选用飞利浦IU22超声诊断仪，探头频率为9-12 MHz。患者体位为仰卧位，使其头部向下、肩膀抬高，确保甲状腺与结节的充分暴露。对患者实施彩色超声检查，对甲状腺结节的成分、性状、回声、边缘、强回声以及甲状腺周边及内部血流情况等进行评分（见表1），再进行甲状腺结节超声分级（TI-RADS）评分，评分≥4分超声诊断为恶性。
1.4 观察指标
对比病理诊断结果，分析评价超声检查、AKR1B10检测及二者联合诊断甲状腺结节良恶性的应用价值。以病理诊断结果为金标准，评估三种诊断方法的准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。
1.5 统计学方法
采用SPSS 18.0软件进行数据分析。其中AKR1B10在不同甲状腺病理组织中的表达差异采用卡方检验，当理论频数小于1时，采用Fisher确切概率法;AKR1B10表达水平与临床病理参数之间的关系采用相关性分析。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 AKR1B10在甲状腺乳头状癌中的表达
AKR1B10在PTC组织内主要表达于乳头状细胞的胞浆内，不均匀分布，细胞染色深浅不一（图1）。
A～D分别表示AKR1B10在甲状腺癌组织免疫组化评分的四个等级，依次是（A）、+（B）、++（C）和+++（D），染色强度逐渐增强
2.2 AKR1B10在甲状腺不同病理组织中的表达
AKR1B10在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿组织、甲状腺滤泡性腺瘤中不表达或低表达（图2A-C），在甲状腺乳头状癌中表达较高（图2D）。
正常甲状腺组织（A），结节性甲状腺肿（B），甲状腺滤泡性腺瘤（C），甲状腺乳头状癌（D）的免疫组化染色结果。
2.3 AKR1B10表达水平在甲状腺乳头状癌及甲状腺良性病变中的差异分析
AKR1B10在甲状腺乳头状癌阳性表达率最高（88.0%），在桥本甲状腺炎内的阳性表达率次之（82.5%），在结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡性腺瘤、癌旁组织和甲状腺正常组织内低表达（阳性率分别为22.5%、32.5%、28.6%、38.5%）。PTC与桥本甲状腺炎的比较不具有统计学差异（χ2=0.218 ，p>0.05），与结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡性腺瘤、PTC癌旁组织、正常甲状腺组织比较，差别均有显著性（p<0.05）。
2.4 单用及联合超声及肿瘤标志物AKR1B10检查诊断甲状腺肿瘤的结果
单用超声诊断甲状腺肿瘤的准确率为75%（27/36），单用肿瘤标志物AKR1B10诊断甲状腺肿瘤的准确率为75%（27/36），超声联合肿瘤标志物AKR1B10检查诊断甲状腺肿瘤的准确率为97.20%（35/36），见表2。
2.5 单用及联合肿瘤标志物AKR1B10及超声检查对肿瘤的诊断效果评价
单用超声诊断甲状腺肿瘤的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值 分别是90.48%、53.33%、73.08%、80.00%，单用肿瘤标志物AKR1B10诊断甲状腺肿瘤的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别是85.71%、60.00%、75.00%、75%，超声联合肿瘤标志物AKR1B10检查诊断甲状腺肿瘤的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别是100%、93.33%、95.5%、100%，见表3。
3 讨论
本研究对比分析了超声、肿瘤标志物AKR1B10检查以及联合超声与肿瘤标志物AKR1B10检查诊断甲状腺结节良恶性的应用价值，结果显示联合两种方法诊断的准确度、特异性显著高于超声和AKR1B10检测。由此提示，在甲状腺结节良恶性诊断中，联合超声与肿瘤标志物AKR1B10检查可发挥较高的应用价值，有助于提高临床诊断的准确性。下一步我们将研究AKR1B10作为甲状腺癌血清标志物的可能性，并开发血清诊断试剂盒，将血清AKR1B10浓度联合超声检查应用到甲状腺良恶性结节诊断与鉴别诊断中，提高甲状腺癌临床诊断灵敏度、特异度和准确度。
参考文献
韩婧，康骅：甲状腺癌的发病现状及影响因素[J].實用预防医学，2018，25（07）：894-897.
雷蓓：超声新技术在甲状腺良恶性结节诊断中的价值[J].影像研究与医学应用，2019， 3（06）：99-100.
