何首乌降血脂_何首乌降血脂有效部位及量效关系的实验研究
时间：2019-01-15 04:36:01 来源：达达文档网 本文已影响 人 
【摘要】 目的 研究何首乌降血脂的有效部位及其量效关系。方法 选用CO2超临界、系统溶媒(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、75%乙醇、水)和水提醇沉的方法分别对何首乌进行提取，观察各提取物对腹腔注射蛋黄乳液致高血脂症模型小鼠血清总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)的影响，初步明确何首乌降血脂的有效活性部位，并对该有效部位进行量效关系的评定。结果 何首乌超临界提取物、乙醇提取物和水提取物均有显著的降低血清TC和TG的作用，其中何首乌超临界提取物的降脂效果优于乙醇提取物和水提取物，其在0．50~1．00 g/(kg•d)时降脂效果最佳；何首乌石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和水提醇沉物虽也有一定的降血脂作用，但与对照组相比差异无统计学意义。结论 何首乌超临界提取物为何首乌降血脂的有效活性部位，其有效剂量范围在0．50~1．25 g/(kg•d)之间。�
【关键词】何首乌；活性部位；降血脂药；量效关系
Experimental study on the active situs of radix polygoni multiflori to reduce blood lipid and their dose-effect relation
LI Zong-cheng,JIN Zai-jiu,CUI Shuang,et al.Changchun lvyuan Center for Disease Control and Prevention,Changchun ctiy 130062, China
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【Abstract】 Objective To probe into the active situs of supercritical fluid extraction from radix polygoni multiflori reducing blood lipid and research the best dose-efect relation of the active situs.Methods Using supercfitical fluid extraction(SFE),systematic solvents(petroleum benzin,ethyl acetate,n-butanol,75%alcohol and water)and alcohol-precipitation after water-extraction to extract the radix polygoni multiflori.Results All the supercritical fluid extract,ethanol extract and water extract of polygonum multiflorum perform significantly effect to reduce TC and TG.In which the supercritical fluid extract of polygonum multiflorum makes better performance on reducing lipid than the other two.The best effect of reducing lipid could be attained when the rate is 0．50~1．00 g/（kg•d）.The petroleum ether extracts,acetic ether extracts and ethanol sediments of polygonum multiflorum play a certain role of reducing blood lipid,but they have no statistical significance comparing to the control group.Conclusion The supercritical fluid extraction from polygonum multiflorum Thunb ethyl acetate extract is the active situs of polygonum multiflorum Thunb reducing blood lipid；it’s effective dose ranges0．50~1．25 g/(kg•d).�
【Key words】Radix polygoni multiflori；Active situs；Antilipemic agents；Dose- effect relationship
何首乌是常用补益中药，来源于蓼科植物何首乌的干燥块根。中医药认为，何首乌味苦、涩，性温，归肝、心、肾经，具有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨，润便，解毒，养心安神，祛风湿等功效。现代研究表明，何首乌主要含有蒽醌、二苯乙烯苷、磷脂等成分[1]，具有降血脂、延缓动脉粥样硬化、抗衰老、提高免疫力、益智等作用，能显著降低血清总胆固醇和三酰甘油，临床用于高血脂症[2]。目前动脉粥样硬化、冠心病、脑血管疾病的发病率逐年上升，新的流行病学研究证实，三酰甘油的升高可作为动脉粥样硬化的独立危险因素[3-4]。通过饮食疗法或药物降低血脂水平，可防止动脉粥样硬化或延缓动脉粥样硬化的进程，有助于降低冠心病、脑血管疾病的发病率及病死率[5]。本实验观察了何首乌超临界提取物、系统溶媒提取物及水提醇沉物对高血脂症模型小鼠血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的影响。筛选了其降血脂的有效部位并初步确定了其量效关系。�
1 材料�
1．1 药品与试剂 何首乌，市售，经延边大学药学院生药教研室鉴定为正品；血脂康胶囊(北京北大维信生物科技有限公司，批号:20070911)；总胆固醇测定试剂盒；三酰甘油测定试剂盒，其他试剂均为分析纯。�
1．2 动物 昆明种小鼠200只，体质量(22±2)g，雌雄各半，由延边大学医学院实验动物科提供。�
1．3 仪器与设备 超临界流体CO2萃取装置；日立7020型全自动血液生化分析仪。�
1．4 统计学方法 计量数据以均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS10．0软件，采用方差分析进行比较。�
2 实验方法�
2．1 药物的制备 ①取何首乌粉碎成粗粉，用80%乙醇回流提取3次，回收乙醇，水溶液分别采用极性由小到大的溶剂石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取；②取何首乌粗粉，用75%乙醇回流提取3次，过滤，回收乙醇，并浓缩一定的浓度，备用；③取何首乌粗粉，用水及水提醇沉的方法分别对其进行提取，滤过后在水浴上蒸干，备用。�
何首乌超临界提取物的制备取干燥何首乌饮片，粉碎，过55目筛，称取1000 g粉碎过筛何首乌，装入超临界流体CO2萃取装置的萃取釜中，加入一定量夹带剂(无水乙醇)，在设定的萃取温度60℃和萃取压力42 mPa下进行萃取，萃取时间4 h，夹带剂用量100 ml/100 g，收集萃取液，备用；实验时各提取物用2%吐温-80蒸馏水溶解配制。�
2．2 何首乌降血脂有效部位的确定 取小鼠100只，随机分为10组，每组10只，即:①空白对照组；②模型对照组；③阳性对照血脂康组；④超临界提取物组；⑤石油醚提取物组；⑥乙酸乙酯提取物组；⑦正丁醇提取物组；⑧75%乙醇提取物组；⑨水提取物组；⑩水提醇沉物组。禁食16 h，①、②组灌胃溶媒(含2%吐温-80的蒸馏水，0．2 ml/10 g)，③~⑩组分别灌胃相应药物(1 g/kg)，2 h后除空白对照组外每鼠腹腔注射75%蛋黄乳液0．1 ml/10 g(取1~2 d 新鲜鸡蛋黄用生理盐水配成75%蛋黄乳液)，6 h后每组再次灌胃相应溶媒或药物，剂量同前，于注射蛋黄乳液20 h后颈动脉取血，分离血清，测定TC及TG含量，结果见表1,图1,2。�
2．3 何首乌降血脂有效部位的量效关系 在初步明确何首乌降血脂有效部位为何首乌超临界提取物的基础上，对其进一步进行了量效关系的研究。取小鼠100只，雌雄各半，随机分为10组，每组10只，即①空白对照组；②模型对照组；③血脂康组；④~⑩组分别为不同剂量何首乌超临界提取物组，给药时均按0．2 ml/10 g 给予不同浓度的何首乌超临界提取物。造模及测定方法同2．2。不同剂量何首乌超临界提取物组对血清TC及TG的影响，结果见表2，图3,4。�
3 结果与分析�
3．1 何首乌降血脂有效部位的确定 由表1结果显示，模型对照组血清TC和TG与空白对照组比较差异有统计学意义(P0．05)。但直观分析得出何首乌超临界提取物的降脂效果优于70%乙醇提取物组和水提取物组。何首乌正丁醇提取物组TG与模型组相比较差异有统计学意义(P0．05)；何首乌石油醚提取物组、乙酸乙酯和水提醇沉组提取物组与模型对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)。故初步确定何首乌降血脂的有效活性部位为超临界提取物。�
3．2 何首乌降血脂有效部位的量效关系 由表2结果显示，模型对照组血清TC和TG与空白对照组比较差异有统计学意义(P0．05)；4．35%、5．80%何首乌超临界提取物组血清TG与模型组比较差异有统计学意义(P0．05)。�
相关性分析:血清TC、TG与何首乌超临界提取物组给药剂量之间均无直线相关关系(r=0．363 9，r=0．499 3；P>0．05)，但在0．25~1．00 g/（kg•d）时两者与提取物之间有负直线相关关系(r=-0．804 4，r=-0．835 3；P[6]。随着近年来人们饮食中脂肪摄入的增多与运动量的减少，高脂血症的发病率在不断增加。何首乌作为常用降血脂药物，其降血脂的药理作用已得到肯定[1,7]。本实验采用超临界、系统溶媒及水提醇沉的方法分别对何首乌进行提取，观察各提取物的降脂效果，结果发现何首乌超临界提取物、75%乙醇提取物和水提取物均有显著的降低血清总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)作用；何首乌石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和水提醇沉物虽也有一定的降脂作用，但与对照组相比差异无统计学意义，故何首乌石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和水提醇沉物对血脂无明显影响；其中何首乌超临界提取物的降脂效果直观分析优于70%乙醇提取物和水提取物，加之70%乙醇和水提取物含成分较复杂，黏稠度大，进一步分离纯化困难，故初步认定何首乌超临界提取物为其降血脂的有效活性部位。在此基础上对该活性部位又进行了量效关系的研究，结果表明在0．25~1．00 g/（kg•d）剂量时血清TC和TG何首乌超临界提取物呈负直线相关，随提取物用量的增大血清TC、TG下降；同时，在1．00~1．75 g/（kg•d）剂量时血清胆固醇和三酰甘油与何首乌超临界提取物呈正直线相关，随提取物用量的增大血清胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)有升高的趋势。结合各不同剂量组血清TC和TG与模型组相比较结果，本研究认为何首乌超临界提取物降脂有效剂量为0．50~1．25 g/（kg•d），但以在0．75~1．00 g/（kg•d）剂量时降脂疗效最佳，增大或减小剂量其降血脂作用均有减弱的趋势，尤其是在使用大剂量时血脂不下降反而呈上升倾向，考虑可能是随剂量的增大提取物中所含的油脂类成分相应增多，一定程度上掩盖了其降血脂有效成分的药理效应所致，其具体机制及何首乌降血脂主要活性成分和作用机制尚有待进一步的研究。综上所述，本实验初步明确了何首乌降血脂的有效活性部位及其量效关系，为进一步研究何首乌降血脂的活性成分和研制开发新型的降血脂药物提供了实验依据。�
参考文献
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［6］ 张弛,王继峰,钱家骏．中药治疗高脂血症实验研究的新进展．北京中医药大学学报,2000,23(4):43-45.�
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