ＴＬＲ４基因的ｓｈＲＮＡ对内毒素刺激下ＲＡＷ２６４．７细胞ＴＬＲ２表达的影响及机制|基因武道
时间：2019-01-15 04:38:46 来源：达达文档网 本文已影响 人 
[摘要]目的：观察针对Toll样受体4的发夹结构RNA(short hairpin RNA，shRNA)对内毒素刺激后小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞Toll样受体2表达的影响，并探讨其机制。方法：将携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及shRNA克隆位点的质粒pEGFP/TLR4-siRNA，运用脂质体Lipofectamine2000转染至小鼠巨噬细胞系RAW264.7。转染24 h后予新霉素(G418)筛选获取稳定转染细胞株。然后将细胞分为三组：空白组(Blank group)，未转染细胞LPS刺激组(LPS group)和稳定转染细胞LPS刺激组(LPS-TLR4-siRNA group)，采用荧光定量PCR及流式细胞学方法检测各组细胞TiB2 mRNA和蛋白的表达，Western blot检测NF―KB p65的表达，同时用ELISA方法检测细胞分泌的TNF-α水平的变化。 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文
