淫羊藿苷对小鼠学习记忆障碍的保护作用的实验研究？
时间：2021-04-23 07:58:31 来源：达达文档网 本文已影响 人 
摘要：目的 探讨淫羊藿苷（ICA）对东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠的保护作用。方法 40只小鼠随机分为4组（对照组，模型组，ICA低、高剂量组）。连续给药10d，通过自主活动、Morris水迷宫实验检测学习记忆能力的改变。结果 ICA可以改善记忆障碍小鼠的自主活动次数、空间探索能力以及定位航行能力，缩短小鼠在空间探索及定位航行实验的潜伏期。结论 淫羊藿苷可改善东莨菪碱所致小鼠的学习记忆障碍。
关键词：淫羊藿苷；东莨菪碱；学习记忆障碍；保护作用
阿尔茨海默病（ Alzheimer"s disease，AD） 是一种以认知功能障碍为主要特征的渐进性神经退行性疾病，随着社会老龄化，阿尔茨海默病发病率逐年增高，严重影响老年人的生活质量。因此探寻该病的病因和治疗具有深远的临床意义和社会意义。目前，临床治疗痴呆多选用胆碱酯酶抑制剂。为寻找有效治疗药物，经查阅大量的文献资料，小檗科淫羊属植物淫羊藿（Herba Epimedii），其主要有效成分为淫羊藿苷（icariin）[1-2]。可提高脑内胺类递质水平，对氧自由基有较强的清除能力，具有抗氧化、延缓衰老的作用，还可提高免疫功能，抑制血管平滑肌细胞外Ca2+内流，降低脑血管阻力，改善脑缺血的症状，抑制血栓形成。本研究旨在探讨淫羊藿苷对东莨菪碱所致鼠学习记忆障碍的影响及其作用机制，为其进一步研究提供基础药理学依据。
1 实验材料
1.1 动物 BALB-C小鼠，♀♂兼半，体重（24g±2）g，由河南科技大学动物实验中心提供。
1.2 药物与试剂 淫羊藿苷（西安昊轩生物科技有限公司，批号20140218，纯度：98%）；注射用丁溴东莨菪碱（成都天台山制药有限公司，批号120701）；氯化钠注射液0.9%（河南科伦药业有限公司，批号B14012004-2）；胆碱酯酶试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1.3 仪器 冷冻高速离心机（TGL-16G，上海安亭科学仪器厂）；722S分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；FA1004B（上海精密科学仪器有限公司）；Morris水迷宫（成都泰盟有限公司）。
2 实验方法
2.1 分组 BALB-C小鼠40只，随机分为4组：对照组（生理盐水，0.1ml/10g，ip）、模型组（东莨菪碱，0.1ml/10g，ip）、淫羊藿苷高、低剂量组（在模型组基础上给淫羊藿苷75mg/kg、25mg/kg，ig）。
2.2 自主活动实验 给药10d后进行自主活动实验，让小鼠在活动盒（4×6个格，每格8.5cm×8.5cm）内进行自主活动，记录小鼠在5min内所走的格子数。
2.3 Morris水迷宫实验 各组于给药第11d进行Morris水迷宫实验。平台放置于其中的一个象限中间，水池水面高出平台2cm，水温控制在（25±2）℃。在池中注水并放入适量牛奶使水呈乳白色，每只小鼠身上带有黄色标记，第一天进行定位航行，训练1次，60s未找到平台者，随将其放置平台上10s进行引导，记录潜伏期和有效运动距离。第2、3、4d重复进行。第5d进行空间探索测试，撤除平台，在同样的入水点将小鼠放入水中，让小鼠在水中游泳60s，记录有效运动时间和有效运动距离[3-4]。
2.4 统计学处理 使用SPSS13.0软件进行统计学检验，数据用x±s表示。
3 结果
3.1 自主活动实验结果 与对照组相比，模型组自主活动次数明显减少；与模型组相比，淫羊藿苷组自主活动明显增加（P<0.05），见表1。
3.2 Morrois水迷宫实验
3.2.1药物对小鼠定位航行能力的影响如图1～4。
与对照组相比，模型组的潜伏期长（P<0.05），有效运动距离短，表明模型组小鼠的学习记忆能力差，造模成功；与模型组相比，淫羊藿苷2个剂量组的潜伏期短，有效运动距离长，表明淫羊藿苷对小鼠的学习记忆能力具有改善作用（见表2）。
3.2.2 药物对小鼠空间探索能力的影响 ICA对空间搜索能力的影响：与对照组相比，模型组的空间搜索能力下降，在平台象限停留的时间显著缩短（P<0.05）；有效区域运动距离显著减少（P<0.05）。ICA组小鼠的探索能力明显提高（见表3）。
由表3及探索轨迹图像可见：模型组搜索距离明显延长，在原安全岛所在象限的搜索时间明显减少。淫羊藿苷组均可缩短小鼠的逃避潜伏期及搜索距离，明显延长在原安全岛所在象限的搜索时间，增加游泳距离。
4 讨论
随着老龄人的增加，老年痴呆发病率呈上升趋势，老年性痴呆是以进行性认知功能障碍为主要临床表现的神经变性疾病，学习记忆障碍是其主要表现。老年斑、神经纤维缠结和神经元丢失为其特征，众多学说如中枢胆碱能低下、钙稳态失衡、细胞凋亡、缺氧能量代谢障碍等为其发病机制，因此，目前对其治疗采用综合方法，临床治疗的一线药物多是用拟胆碱药、扩脑血管药以及抗氧化药等[5-6]。
本实验通过腹腔注射东莨菪碱，较好的建立了痴呆小鼠模型。在传统西药治疗的基础上，中草药的开发利用将为其治疗保全增效，淫羊藿性味辛甘、温，有补肾壮阳、祛风除湿的功效。还具有强心、降血压、抗心律失常、增加脑血流量、抑菌、抗病毒、抗炎、降血脂、抗肿瘤等多种作用，具有较高的药用和保健价值。其有效成分淫羊藿苷能增加心脑血管血流量、促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有补肾壮阳、抗衰老、抗肿瘤等功效[7-8]。通过本实验研究可见淫羊藿苷明显缩短到达平台的潜伏期，有效距离明显延长等，ICA改善学习记忆障碍小鼠的学习记忆功能。为其今后的开发利用奠定了基础，至于其作用机制尚有待于进一步的探讨。
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