电针诱导大鼠脑缺血耐受作用的穴位特异性研究|电针大鼠图片
时间:2019-01-16 04:43:08 来源:达达文档网 本文已影响 人
[摘 要]目的:探讨电针诱导大鼠脑缺血耐受作用的穴位特异性。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为4组,每组各10只,即空白组。戊巴比妥组。针刺肢体组和针刺"百会"组。最后一次处理24h后采用颈内动脉尼龙线线栓法致右大脑中动脉栓塞(120min)模型,观察再灌注后24h时神经功能损害并取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积。结果:再灌注24h时神经功能损害评分及脑梗死容积。针刺"百会"组均明显小于其余3组(P均0.05)。结论:电针"百会"预处理减轻大鼠神经功能损害程度明显优于针刺肢体。
[主题词]电针;脑缺血,暂时性/针灸疗法;穴位特异性
AcupointSpecificityofElectroacupuncturePreconditioningEffectonCerebralIschemiaI
njuryinRats
LuZhihong,XiongLize,ZhuZhenghua,etal.(DepartmentofAnesthesiology,
XijingHospitaloftheFourthMilitaryMedicalUniversity,Xian710033,China)
[Abstract]Purpose
Toinvestigateacupointspecificityofelectroacupuncturepreconditioningeffectoncerebralischemi
a.Methods 40maleSDratswererandomlydividedinto4groups,controlgroup,
pentobarbitalgroup,needlinglimbgroupandneedlingpointBaihui(GV20)group,
10ratseachgroup.24hoursafterthelasttreatment,
therightmiddlecerebralarterywasoccludedfor120min,
andtheneurologicaloutcomewasevaluatedafterreperfusionfor24hours,
andthenthecerebralinfarctsizewasinvestigatedwithTTCstaining.Results
TheneurologicaldeficitscoreandtheinfarctsizeintheneedlingpointBaihuigroupwerelowerthanth
atintheother3groups,respectively,P0.05.Conclusion
ElectroacupunctureatBaihuicanreduceneurologicalinjuryinducedbytemporarymiddlecerebrala
rteryocclusionandtheeffectisbetterthanthatofneedlingthelimb.�
[Keywords]Electroacupuncture;CerebralIschemia,Transient/acupther;
SpecificityofAcupoints
动物实验及临床实践已证明针灸对脑缺血损伤具有治疗作用[1],我们以前的研究也表明重复电针刺激对大鼠短暂性大脑中动脉缺血具有预处理效应[2]。这一预处理效应是否具有穴位特异性尚未见报道,为此,本实验观察了针刺百会穴和针刺肢体之间有无差异。
1 材料和方法
1.1 动物及分组
实验动物由第四军医大学实验动物中心提供。健康雄性SD大鼠(280~320g)40只,随机分为4组,每组10只。空白对照组(Control)。戊巴比妥组(PB)。针刺肢体组(EL)和针刺"百会"组(EB)。空白组未行任何预处理;戊巴比妥组按40mg/kg腹腔注射戊巴比妥,1次/d,连续5d;针刺肢体组与针刺"百会"组在戊巴比妥麻醉(40mg/kg)下分别予以电针刺激左前肢与"百会"穴,每日1次,每次30min,连续5d。"百会"穴在颅骨正中,向前斜刺2mm。电针刺激仪为青岛产G6805-2型,采用疏密波,频率15Hz,强度为1mA。所有动物最后一次处理24h后予脑缺血造模。
1.2 局灶性脑缺血模型
术前禁食12h,不禁水。动物4%异氟醚诱导麻醉,2%异氟醚吸入维持麻醉深度,保留自主呼吸。术中体温由肛温探头连接多功能监测仪(Spacelab,美国)监测,并用烤灯维持在37~37.5℃。
大脑中动脉阻闭(MCAO)模型采用右侧颈内动脉尼龙线线栓法,根据Tatlisumak等的方法[3],并参照我们以前的报道[4],即动物麻醉后取颈正中切口,暴露右侧颈总动脉。颈外动脉及颈内动脉,结扎颈总动脉。颈外动脉,于颈总动脉分叉下方剪一切口,将一预先用酒精灯烧成圆头的尼龙线置入颈内动脉17.5mm,直到有轻微阻力感为止。阻闭120min后抽出尼龙线,恢复再灌注。
1.3 动物恢复及神经行为学评估
麻醉苏醒后,将动物放回鼠笼,自由饮食。脑缺血再灌注后24h,由一不了解分组情况的观察者评估记录神经行为学评分,按ZeaLonga等[5]的6级评分法:0分,无功能障碍;1分,不能伸展左侧前肢;2分,向左侧旋转;3分,向左侧倾倒;4分,无自主活动伴意识抑制;5分,死亡。
1.4 脑梗死灶测量
24h神经行为学评分完成后,动物2%戊巴比妥钠深麻醉后处死,迅速取出鼠脑,置于冰盐水中10min,取冠状面均匀切成2mm厚脑片,迅速放入2%TTC溶液(37℃)中染色30min,然后用10%福尔马林缓冲液固定。24h后用数码相机(KODAK,DC240,美国)拍照,输入计算机,用图像处理软件(ADOBE,PHOTOSHOP5.0)计算梗死面积(粉红色区为正常脑组织,白色区为梗死区),各脑片梗死面积之和乘以厚度(2mm)为总的梗死容积。
1.5 统计学分析
数值用x-±s表示,梗死容积用单因素方差分析方法(ANOVA)统计,神经行为学评分用Kruskal-Wallis方法检验,P[6]等最早用沙土鼠全脑缺血模型发现缺血预处理可诱导脑缺血耐受以来,对脑缺血耐受现象已进行了大量动物和临床研究。一些化学物质或药物,如内毒素、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1(IL-1)以及神经毒素3-硝基丙酸(3-ni-tro-propionicacid)等可诱导脑缺血耐受的产生[7]。我们以前的研究也表明[4]:异氟醚及高压氧预处理均具有诱导脑缺血耐受的作用。这些药物和措施虽为可能的临床应用奠定了一定的基础,但均存在着不同程度的局限性。电针是我国传统针灸与现代电学技术结合的产物,安全可靠,副作用小,患者易接受。我们以前的研究发现电针预处理可模拟缺血预处理诱导脑缺血耐受的产生,该研究中电针刺激点为"百会"穴。其作用是通过特定穴位还是通过疼痛刺激尚不清楚,因此我们设计了本实验。结果表明同样电针刺激条件,如选择"百会"穴可诱导脑缺血耐受,而选择左前肢为刺激点,则神经损害程度虽较对照组有减轻趋势,但并无统计学意义。说明电针刺激的脑缺血预处理效应具有穴位特异性。
祖国医学认为,穴位是经络气血聚集。出入体表。施行针刺的特定部位,是针灸的刺激点和针灸治疗的基础,是内脏生理机能和病理变化的感受点和反应点。根据中医传统理论,脑为髓海,其气血输注上在于百会,下在于风府。百会为督脉穴,针刺督脉可以振奋周身之阳气,"病变在脑,首取督脉",为治疗脑缺血性疾病的首选[8]。因此我们在以前的研究中选择"百会"作为针刺点,结果表明,重复电针刺激"百会"可诱导脑缺血耐受现象的产生[2]。
王军等[9]研究发现用SD大鼠MCAO模型针刺患侧肢体穴位能显著改善其神经行为损害症状,被动性条件反射错误次数明显减少,梗死容积显著减小。而针刺健侧穴位各观察指标则与对照组无显著差异。贺晓燕等[10]应用Wistar大鼠则报道电针手术侧(健侧)穴位也可显著改善神经损害程度。因本研究所取动物种系与前者相同,考虑到可能存在的肢体差异性,故选用患侧肢体为对照。
由于清醒状态下对大鼠行电刺激较困难,我们选择戊巴比妥为背景麻醉。实验表明戊巴比妥钠可扩张脑血管,改善脑血流,有可能对脑缺血损害起到改善作用。虽对戊巴比妥的脑保护效应尚存在争议[11],但为避免可能发生的戊巴比妥麻醉的干扰,本实验中除设立空白对照外,还设戊巴比妥对照组,与处理组同一时间予同等剂量的戊巴比妥,结果表明,针刺"百会"穴组脑梗死灶体积较戊巴比妥对照组明显减小,神经功能也有明显改善,从而排除了单纯麻醉诱导缺血耐受的可能。
结论是重复电针刺激"百会"穴行预处理可诱导脑缺血耐受的产生,而同样刺激条件刺激左前肢,则不能诱导脑缺血耐受。这种预处理效应的穴位特异性机制不清楚,有待于进一步研究。
4 参考文献
1 SiQM,WuGC,
CaoXD.EffectsofElectroacupunctureonAcuteCerebralInfarction.AcupunctElectrotherRes,1998;23(2):117
2 熊利泽,路志红.重复电针预处理可减轻大鼠急性短暂性脑缺血损伤.第四军医大学学报,2001,22(21):封2
3 TatlisumakT,TakanoK,
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4 熊利泽,朱正华,董海龙,等.异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用.中华麻醉学杂志,2000;20(12):730
5 ZeaLongaE,
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6 KitagawaK,MatsumotoM,TagayaM,etal.IschemicTol-
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8 庞勇,李保良.不同穴位治疗缺血性中风的临床研究,中国针灸,2000;20(2):69
9 王军,雷新强,范军铭,等.针刺不同侧肢体穴位对急性局灶性脑缺血模型大鼠的影响.中国针灸,1999;19(12):751
10 贺晓燕,杨桂萍,曹序茂,等.电针治疗脑梗塞的实验研究.中西医结合杂志,1991;11(增刊):198
11 ColeDJ,CrossLM,DrummondJC,etal.ThiopentoneandMethohexital,
butnotPentobarbitone,
ReduceEarlyFocalCerebralIschemicInjuryinRats.CanJAnaesth,2001;48(8):807
(收稿日期:2002-01-17,成平发稿)