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    红芪及红芪多糖对气虚血瘀模型小鼠血液流变性的影响

    时间:2021-04-23 07:58:04 来源:达达文档网 本文已影响 达达文档网手机站


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    【摘 要】 目的:观察红芪水煎液及红芪多糖对气虚血瘀模型小鼠血液流变性的影响。方法:通过低温强迫游泳并腰背部皮下注射3%角叉菜胶溶液,制造小鼠气虚血瘀模型。测定小鼠的游泳时间、尾部血栓形成长度、凝血时间,观察红芪水煎液及红芪多糖益气活血功效相关的部分药理作用。结果:红芪水煎液及红芪多糖能明显延长小鼠的游泳时间(P<0.05);能缩短小鼠尾部血栓长度及其百分率(P<0.05);能明显延长凝血时间(P<0.01)。结论:红芪水煎液及红芪多糖能改善气虚血瘀模型小鼠血液流变性。

    【关键词】 红芪水煎液;红芪多糖;气虚血瘀模型;游泳时间;血栓长度;凝血时间

    【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2015)09-0016-03

    Abstract:Objective Observed the influence of Hedysarum polybotrys water decoction and HPS on QDBS mice Hemorheology.Method Low forced swim and lower back subcutaneously 3% carrageenan solution manufacturing mouse blood stasis model.By measuring the mice swimming time,the length of the tail thrombosis,the clotting time to observe HPS Yiqihuoxue efficacy related parts pharmacological effects.Results

    HongQi andHongQipolysaccharidecanextendtheswimmingtimeofmice(P<0.01); Canshortenthetaillengthofthrombusinmiceanditspercentage (P<0.05),Canobviouslyprolongclottingtime (P<0.01).

    Conclusion

    Keywords:Hedysarum polybotrys water decoction;Hedysarum polybotrys polysaccharide;Blood Stasis Model;Swim Time;the Length of Thrombosis;Clotting Time

    气与血是构成人体的基本物质,气血相互依存,相互为用。气具有推动、温煦、化生、统摄血的作用,气不足则血不畅,出现气虚血瘀症状。气虚血瘀证是临床常见病证,尤其在老年心脑血管疾病中表现尤为突出。

    红芪(Radix Hedysari)为豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪的干燥根[1]。红芪性温,味甘,具有补气固表、利尿排毒、排脓、敛疮生肌等功效,现代研究发现,红芪含有多糖类、黄酮类、紫檀素类、香豆素类、生物碱类等活性物质[2-5],具有增强免疫、强心、利尿、降压、保肝及抗炎等作用[6]。

    本文以强迫低温游泳引起劳倦寒凝和角叉菜胶致小鼠尾静脉血栓形成,制造小鼠气虚血瘀模型[8-9],观察红芪多糖及红芪水煎液对模型小鼠血液流变性的影响。

    1 实验材料

    1.1 实验动物 昆明种小鼠,清洁级,雌雄各半,体重18~22g,由兰州大学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(甘)20090004,合格证号:0001598。

    1.2 药物与试剂 红芪采自甘肃宕昌县,经本院中药鉴定教研室鉴定为豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪(Hedysarum polybotrys Hand.Mazz.)的干燥根;红芪多糖溶液制备:方法同文献[7,10];采用苯酚-硫酸比色法测定红芪药材中多糖含量为20.3%;益气养血口服液(批号:20120718,吉林龙泰制药股份有限公司)用生理盐水配成浓度为150%的药液备用;角叉菜胶(CAS号:9000-07-1,上海劲马生物科技有限公司)用生理盐水配成3%的浓度备用。

    1.3 实验仪器 BSIIOS型Sartorius电子天平(北京塞多利斯天平有限公司);DL-5M低速离心机(湖南星科科学仪器有限公司)。

    2 实验方法

    2.1 分组、给药和模型制造 取小鼠70只,雌雄各半,随机分成7组,每组10只。空白组和模型组灌胃生理盐水;阳性药组灌胃益气养血口服液20ml/kg(相当于临床人日用量的30倍);红芪水煎液高、低剂量组分别灌胃红芪水煎液15g/kg和5g/kg(分别相当于临床人日用量的30倍和10倍);红芪多糖高、低剂量组分别灌胃红芪多糖3.04g/kg和1.02g/kg(分别相当于临床人日用量的30倍和10倍),均按照0.2ml/10g给药,每天1次,连续5d。除空白组外,其余各组小鼠每天给药1h后,分别置入水温(14±0.5)℃,直径120cm,水深约25cm的圆形容器中,强迫低温游泳至疲劳状态(以小鼠仅头部露出水面且身体基本与水面垂直为标准)[8-9]。第5天游泳后,除空白组外其余各组小鼠腰背部皮下注射3%角叉菜胶溶液0.1ml/10g,诱发小鼠尾部血栓形成。

    2.2 小鼠游泳时间测定 每天给药1h后,除空白组外,其余小鼠测定强迫游泳至疲劳状态的时间。

    2.3 小鼠尾部血栓长度测定 注射角叉菜胶8 h后,测定小鼠尾部血栓形成长度,并计算血栓长度百分率(血栓长度占全尾长度百分比)。

    2.4 小鼠凝血时间测定(玻片法) 测定小鼠尾部血栓长度后,用眼科弯镊迅速摘取小鼠一侧眼球,于载玻片的两端各滴一滴血,血滴直径约5mm,立即用秒表计时。每隔30s用清洁大头针自血滴边缘向里轻轻挑动一次,观察有无血丝挑起。并记录从血滴接触玻片开始至挑起血丝为止的时间,即凝血时间。

    2.5 数据处理 数据采用SPSS 19.0统计软件处理,计量资料以x±s表示,采用F检验,组间均数比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),P<0.05为差异有统计学意义。

    3 实验结果

    3.1 红芪水煎液及红芪多糖对游泳时间的影响 由表1可知,给药第4天和第5天,益气养血口服液、红芪水煎液、红芪多糖能明显延长气虚血瘀模型小鼠游泳时间。第4天,与模型组比较,益气养血口服液组、红芪水煎液高剂量组、红芪多糖高、低剂量组游泳时间差异有统计学意义(P<0.05);第5天,与模型组比较,各给药组游泳时间差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

    3.2 对气虚血瘀模型小鼠尾部血栓形成的影响 由表2可知,益气养血口服液组、红芪水煎液高、低两个剂量组及红芪多糖高、低剂量组小鼠尾部血栓长度和百分率明显缩短,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

    3.3 对气虚血瘀模型小鼠凝血时间的影响 由表3可知,红芪水煎液高、低两个剂量组、红芪多糖高、低剂量组及益气养血口服液组凝血时间明显延长,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

    4 讨论

    血栓形成(thrombosis)是活体循环系统中血液发生凝固或血液中某些有形成分析出、凝集形成固体质块的过程[13],所形成的固体质块称为血栓(thrombus)。角叉菜胶是从海藻中提取的含硫酸多糖物质[11],具有较强致炎能力,其诱发尾动脉局部血栓与血管内炎症密切相关,炎症时释放的大量炎症介质,如白介素-1、肿瘤坏死因子等可破坏正常内皮细胞维持凝血与纤溶之间的平衡作用,从而促发血栓形成。注射3~14 h后,多数动物尾尖部出现暗红色血栓形成区,并逐渐向尾根部扩大;48~72 h后局部从发绀变为黑色,随后尾部干细断落。由于血栓发生在尾部,界限明显,可从体表观察血栓形成出现的时间与发展过程,测量其波及的范围或长度。所以本实验采用腰背部皮下注射3%角叉菜胶溶液制造小鼠气虚血瘀模型。

    生物流变学创始人ALCopley认为“血液流变学是在宏观、微观、亚微观水平上研究血液的细胞成分和血浆的变形和流动特征,以及与血液直接接触的血管结构的流变特性”。血液流变性的异常,会出现全身或局部循环和微循环障碍。可由某些疾病引起,也可导致某些疾病的进一步恶化,如心脑血管疾病、糖尿病、肺癌、肝肾疾病等,研究具有改善血液流变性作用的药物,对于上述疾病的防治具有重要意义 [14-15]。

    凝血时间是指血液离开血管在体外发生凝固的时间,主要是测定内源性凝血途径中,各种凝血因子是否缺乏,功能是否正常或者是否有抗凝物质增多[16]。将小鼠置于水温保持为(14±0.5)℃的容器内游泳至疲劳状态,捞出后不予保温措施及擦拭水迹,关闭门窗任其暴露于空气中自然晾干,由于寒凝作用使小鼠产生血瘀,再加上每天游泳至疲劳状态,使小鼠每天活动减少,进食量减小,形成气虚状态,故小鼠每天游泳时间逐渐减少。

    中医学认为气与血是人体最基本的宝贵物质,气血不和,百病乃变化而生。研究发现气血病变与血液流变性异常和微循环障碍密切相关,气血不顺可造成血液浓、黏、凝、聚现象,血液淤积和流速减慢是血栓发生并持续存在的原因[16-17]。本研究发现,与模型组相比,红芪水煎液和多糖可以改善小鼠的血瘀状况使其尾部血栓形成时间延长,血栓长度缩短,凝血时间延长。随着红芪水煎液和多糖红芪浓度的增加血栓长度缩短,说明红芪多糖的浓度与小鼠形成血栓呈量效关系。综上所述,红芪多糖及水煎液均能能通过延长气虚血瘀模型小鼠游泳时间、延长凝血时间、抗血栓形成的作用,改善气虚血瘀模型小鼠血液流变性,并且具有明显量效关系,具体机制尚需进一步研究。

    参考文献

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    (收稿日期:2015.02.11)

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